الانتقال إلى المحتوى
LS513
الأنسجة
القولون والمستقيم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
LS513, LS 513

المستندات

LS513

Cell line · رقم المنتج 300457

The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...

€650.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا LS513 هي نموذج سرطان القولون والمستقيم ذو خصائص محددة جيدًا مشتق من خزعة ورم أولي تم أخذها في عام 1985 من مريض أبيض يبلغ من العمر 63 عامًا. تم تصنيف الورم على أنه سرطان الأعور الذي يفرز الموسين من الدرجة C وفقًا لتصنيف دوكس، ويقع في صمام باوهين. تتميز خلايا LS513 بطبيعتها اللاصقة وقد أظهرت مقاومة متعددة للأدوية (MDR)، مما يجعلها نموذجًا قيمًا لدراسة آليات مقاومة الأدوية في سرطان القولون والمستقيم. تظهر هذه الخلايا كفاءة تشكيل مستعمرات بنسبة 30٪ في الميثيل سيلولوز وهي مسرطنة في الفئران العارية، مما يؤكد استخدامها في الدراسات السرطانية.

على المستوى الجيني، تعبر خلايا LS513 عن عدة سمات بارزة. فهي إيجابية بالنسبة لجين p53 الورمي من النوع البري وتعبر عن مستضد السرطان الجنيني (CEA) في حوالي 50٪ من الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، تعبر خلايا LS513 عن مستضدات المركب الرئيسي للتوافق النسيجي (MHC) من الفئة الأولى، بما في ذلك HLA وبيتا 2 ميكروغلوبولين، ولكنها تفتقر إلى مستضدات MHC من الفئة الثانية (HLA-DR وDQ وDP). تنتج الخلايا أيضًا عامل النمو المحول بيتا 1 (TGF beta-1) بمعدل 83 بيكوغرام لكل 106 خلية في 24 ساعة. والجدير بالذكر أن TGF بيتا-1 يعمل كمثبط لتكاثر خلايا LS513، في حين أن TGF بيتا-2 ليس له تأثير كبير على نموها. مقارنة بخط الخلايا LS1034، فإن خلايا LS513 أقل حساسية بمقدار 100 ضعف تجاه TGF بيتا-1، مما يشير إلى استجابات مختلفة لإشارات عامل النمو بين هذين النموذجين من سرطان القولون والمستقيم.

تُظهر خلايا LS513 ملامح فريدة من نوعها في التعبير عن المستضدات، مع إيجابية قوية لمولكول الالتصاق بين الخلايا 1 (ICAM-1) ومستضدات HLA من الفئة الأولى. ويجدر بالذكر بشكل خاص عدم وجود تعبير مستضدات MHC من الفئة II، حيث يشير ذلك إلى آليات محتملة للتهرب المناعي قد تكون ذات صلة بتطور سرطان القولون والمستقيم وانتشاره. هذه الخصائص، إلى جانب مقاومتها للعديد من الأدوية وقدرتها على تكوين أورام في الفئران التي تعاني من ضعف المناعة، تجعل خلايا LS513 أداة قوية لدراسة الأسس الجزيئية والخلوية لسرطان القولون والمستقيم، خاصة في سياق التفاعلات المناعية والمقاومة العلاجية.

الأنسجة
القولون والمستقيم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • LS513
  • LS 513

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، تشكل الأورام في الفئران العارية
النمط الكروموسومي
يمكن تمييز خطين جذعيين. كان الخط الرئيسي ممثلاً في 65% من الخلايا، وكان عدد الكروموسومات النمطي 51,xY و3 علامات هي M1 - der(1)t(1,15)، M2 - der(2)t(2,3)der(3)t(2,3)، M3 وM3 وأحادي الصبغي 15. وكان الخط الجذعي الثاني يحتوي على رقم كروموسوم نموذجي 52،XY وقدم M2 و M3 بالإضافة إلى كروموسوم أحادي الصبغي للذراع الطويل للكروموسوم 1 يسمى M4. كان التثلث الصبغي الثلاثي 5،7، والتثلث الصبغي 13، والصبغي الأحادي 2 و3 موجودين في جميع الخلايا التي تم تحليلها، ولم يظهر في الخط أحادي الصبغي 15.

04المعرّفات

المرجع
LS513 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300457)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1386

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
CEA+ (50%)، p53+ (50%)، p53+
التعبير عن المستضد
المستضد الكارسينومبريوني (CEA)، وICAM-1، وHLA من الفئة الأولى إيجابي
المنتجات
عامل النمو المتحول بيتا 1 (TGF بيتا 1، 83 بيكوغرام لكل 10 خلايا إكسب6 لكل 24 ساعة)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
كل 3 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
63 عاماً
الأصل العرقي
قوقازي