LS513

La linea cellulare LS513 è un modello ben caratterizzato di carcinoma colorettale derivato da una biopsia di tumore primario prelevata nel 1985 da un paziente maschio caucasico di 63 anni. Il tumore è stato classificato come carcinoma cecale secernente mucina di tipo C secondo la classificazione di Dukes, localizzato nella valvola di Bauhin. Le cellule LS513 sono di natura aderente e hanno dimostrato resistenza multipla ai farmaci (MDR), rendendole un modello prezioso per lo studio dei meccanismi di resistenza ai farmaci nel cancro colorettale. Queste cellule mostrano un'efficienza di formazione di colonie del 30% nella metilcellulosa e sono tumorigeniche nei topi nudi, convalidando ulteriormente il loro utilizzo negli studi oncogenici.

A livello genetico, le cellule LS513 esprimono diverse caratteristiche degne di nota. Sono positive per l'oncogene p53 wild-type ed esprimono l'antigene carcinoembrionario (CEA) su circa il 50% delle cellule. Inoltre, le cellule LS513 esprimono antigeni del complesso maggiore di istocompatibilità (MHC) di classe I, tra cui HLA e beta 2 microglobulina, ma sono prive di antigeni MHC di classe II (HLA-DR, DQ e DP). Le cellule producono anche il fattore di crescita trasformante beta 1 (TGF beta-1) ad un tasso di 83 pg per 10⁶ cellule ogni 24 ore. In particolare, il TGF beta-1 agisce come inibitore della proliferazione delle cellule LS513, mentre il TGF beta-2 non ha alcun effetto significativo sulla loro crescita. Rispetto alla linea cellulare LS1034, le cellule LS513 sono 100 volte meno sensibili al TGF beta-1, indicando risposte distinte alla segnalazione del fattore di crescita tra questi due modelli di carcinoma colorettale.

Le cellule LS513 mostrano un profilo unico di espressione antigenica, con forte positività per la molecola di adesione intercellulare 1 (ICAM-1) e gli antigeni HLA di classe I. La mancanza di espressione dell'antigene MHC di classe II è particolarmente degna di nota, poiché suggerisce potenziali meccanismi di evasione immunitaria che potrebbero essere rilevanti per la progressione e la metastasi del cancro colorettale. Queste caratteristiche, insieme alla loro resistenza a più farmaci e alla loro capacità di formare tumori in topi immunocompromessi, rendono le cellule LS513 uno strumento potente per lo studio delle basi molecolari e cellulari del cancro colorettale, in particolare nel contesto delle interazioni immunitarie e della resistenza terapeutica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia