LS513

LS513細胞株は、1985年に63歳の白人男性患者から採取された原発腫瘍生検由来の、よく特徴づけられた大腸癌モデルである。腫瘍はデュークス分類C期の粘液分泌性盲腸癌と分類され、バウヒン弁に位置していた。 LS513細胞は接着性細胞であり、多剤耐性（MDR）を示すことが確認されているため、大腸癌における薬剤耐性メカニズムの研究に有用なモデルである。これらの細胞はメチルセルロース中で30%のコロニー形成能を示し、ヌードマウスにおいて腫瘍形成能を有するため、発癌性研究における有用性がさらに裏付けられている。

遺伝子レベルでは、LS513細胞はいくつかの顕著な特徴を示す。p53野生型癌原遺伝子陽性であり、約50%の細胞で癌胎児性抗原（CEA）を発現する。 さらに、LS513細胞は主要組織適合抗原複合体（MHC）クラスI抗原（HLAおよびβ2ミクログロブリンを含む）を発現するが、MHCクラスII抗原（HLA-DR、DQ、DP）は欠如している。また、細胞は24時間あたり10⁶細胞当たり83pgの速度でトランスフォーミング成長因子β1（TGFβ-1）を産生する。 特筆すべきは、TGFβ-1がLS513細胞の増殖抑制因子として作用する一方、TGFβ-2は細胞増殖に有意な影響を与えない点である。LS1034細胞株と比較して、LS513細胞はTGFβ-1に対する感受性が100倍低く、これら2つの大腸癌モデル間で成長因子シグナル伝達に対する反応が異なることを示している。

LS513細胞は、細胞間接着分子1（ICAM-1）およびHLAクラスI抗原に対する強い陽性を示すなど、特異的な抗原発現プロファイルを示す。 特に注目すべきはMHCクラスII抗原の発現欠如であり、これは大腸癌の進行と転移に関連する可能性のある潜在的な免疫回避メカニズムを示唆している。これらの特徴に加え、多剤耐性および免疫不全マウスにおける腫瘍形成能を有することから、LS513細胞は大腸癌の分子的・細胞的基盤、特に免疫相互作用と治療抵抗性の観点から研究する上で強力なツールとなる。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。