LS513
Cell line · Nomor produk 300457
The LS513 cell line is a well-characterized colorectal carcinoma model derived from a primary tumor biopsy taken in 1985 from a 63-year-old Caucasian male...
Penyesuaian / Rekomendasi
- LS513Cell line€650.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Baris sel LS513 adalah model karsinoma kolorektal yang telah terdefinisi dengan baik, yang berasal dari biopsi tumor primer yang diambil pada tahun 1985 dari pasien laki-laki Kaukasia berusia 63 tahun. Tumor tersebut diklasifikasikan sebagai karsinoma sekresi mukus Dukes' C pada usus buntu, yang terletak di katup Bauhin. Sel LS513 bersifat adheren dan telah menunjukkan resistensi multidrug (MDR), menjadikannya model yang berharga untuk mempelajari mekanisme resistensi obat pada kanker kolorektal. Sel-sel ini menunjukkan efisiensi pembentukan koloni sebesar 30% dalam metilselulosa dan bersifat tumorigenik pada tikus nude, yang semakin mengukuhkan penggunaannya dalam studi onkogenik.
Pada tingkat genetik, sel LS513 menunjukkan beberapa fitur menonjol. Sel ini positif untuk onkogen p53 tipe liar dan mengekspresikan antigen embrio karsinoma (CEA) pada sekitar 50% sel. Selain itu, sel LS513 mengekspresikan antigen kompleks histokompatibilitas mayor (MHC) kelas I, termasuk HLA dan beta 2 mikroglobulin, tetapi tidak memiliki antigen MHC kelas II (HLA-DR, DQ, dan DP). Sel-sel ini juga memproduksi faktor pertumbuhan transformasi beta 1 (TGF beta-1) dengan laju 83 pg per 10⁶ sel per 24 jam. Secara mencolok, TGF beta-1 bertindak sebagai penghambat proliferasi sel LS513, sedangkan TGF beta-2 tidak memiliki efek signifikan pada pertumbuhannya. Dibandingkan dengan garis sel LS1034, sel LS513 100 kali kurang sensitif terhadap TGF beta-1, menunjukkan respons yang berbeda terhadap sinyal faktor pertumbuhan antara kedua model karsinoma kolorektal ini.
Sel LS513 menunjukkan profil ekspresi antigen yang unik, dengan positif kuat untuk molekul adhesi antar sel 1 (ICAM-1) dan antigen HLA kelas I. Ketiadaan ekspresi antigen MHC kelas II patut diperhatikan, karena hal ini menyarankan mekanisme penghindaran imun yang berpotensi relevan dengan progresivitas dan metastasis kanker kolorektal. Fitur-fitur ini, bersama dengan resistensi mereka terhadap multiple obat dan kemampuan mereka untuk membentuk tumor pada tikus yang imunokompromais, menjadikan sel LS513 alat yang kuat untuk mempelajari dasar molekuler dan seluler kanker kolorektal, terutama dalam konteks interaksi imun dan resistensi terapeutik.
- Tisu
- Kolorektal
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Sinonim
- LS513
- LS 513
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Tumorigenik
- Ya, membentuk tumor pada tikus telanjang
- Kariotipe
- Dua garis induk dapat dibedakan. Yang utama diwakili dalam 65% sel, dengan jumlah modal 51,xY dan 3 penanda, M1 - der (1) t (1,15), M2 - der (2) t (2,3) der (3) t (2,3), M3, dan monosomi 15. Galur induk kedua memiliki jumlah kromosom modal 52,xY dan menghasilkan M2 dan M3 ditambah isokromosom untuk lengan panjang kromosom 1 yang disebut M4. Trisomi 5,7, tetrasomi 13, dan monosomi 2 dan 3 terdapat pada semua sel yang dianalisis, galur ini tidak menunjukkan monosomi 15.
04Pengidentifikasi
- Referensi
- LS513 (Nomor katalog Cytion 300457)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1386
05Ekspresi dan kerentanan
- Ekspresi protein
- CEA+ (50%), p53+
- Ekspresi antigen
- Carcinoembryonic antigen (CEA), ICAM-1, HLA kelas I positif
- Produk
- Mengubah faktor pertumbuhan beta 1 (TGF beta-1, 83 pg per 10 sel exp6 per 24 jam)
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 1 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- Setiap 3 hari
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 63 tahun
- Etnis
- Kaukasia
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya
