LS513

Linia komórkowa LS513 jest dobrze scharakteryzowanym modelem raka jelita grubego pochodzącym z biopsji guza pierwotnego pobranej w 1985 roku od 63-letniego pacjenta rasy kaukaskiej. Guz został sklasyfikowany jako rak jelita ślepego wydzielający mucynę typu C według klasyfikacji Dukesa, zlokalizowany w zastawce Bauhina. Komórki LS513 mają charakter adhezyjny i wykazują wielolekową oporność (MDR), co czyni je cennym modelem do badania mechanizmów oporności na leki w raku jelita grubego. Komórki te wykazują 30% wydajność tworzenia kolonii w metylocelulozie i są nowotworowe u myszy nagich, co dodatkowo potwierdza ich przydatność w badaniach onkogennych.

Na poziomie genetycznym komórki LS513 wykazują kilka istotnych cech. Są one pozytywne pod względem onkogenu p53 typu dzikiego i wykazują ekspresję antygenu rakowo-płodowego (CEA) w około 50% komórek. Ponadto komórki LS513 wykazują ekspresję antygenów głównego kompleksu zgodności tkankowej (MHC) klasy I, w tym HLA i beta 2 mikroglobuliny, ale nie wykazują ekspresji antygenów MHC klasy II (HLA-DR, DQ i DP). Komórki te wytwarzają również transformujący czynnik wzrostu beta 1 (TGF beta-1) w ilości 83 pg na 10⁶ komórek na 24 godziny. Co ciekawe, TGF beta-1 działa jako inhibitor proliferacji komórek LS513, podczas gdy TGF beta-2 nie ma znaczącego wpływu na ich wzrost. W porównaniu z linią komórkową LS1034, komórki LS513 są 100-krotnie mniej wrażliwe na TGF beta-1, co wskazuje na różne reakcje na sygnalizację czynników wzrostu między tymi dwoma modelami raka jelita grubego.

Komórki LS513 wykazują unikalny profil ekspresji antygenów, z silną pozytywnością dla cząsteczki adhezyjnej międzykomórkowej 1 (ICAM-1) i antygenów HLA klasy I. Na szczególną uwagę zasługuje brak ekspresji antygenów MHC klasy II, ponieważ sugeruje to potencjalne mechanizmy unikania odpowiedzi immunologicznej, które mogą mieć znaczenie w progresji raka jelita grubego i przerzutach. Cechy te, wraz z opornością na wiele leków i zdolnością do tworzenia nowotworów u myszy z obniżoną odpornością, sprawiają, że komórki LS513 są potężnym narzędziem do badania molekularnych i komórkowych podstaw raka jelita grubego, zwłaszcza w kontekście interakcji immunologicznych i oporności na leczenie.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym