- Szövet
- Érrendszeri endothelium
Dokumentumok
PIEC
Cell line · Termékszám 305213
Személyre szabás / Ajánlások
- PIECCell line€800.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
A PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) egy spontán immortális endoteliális sejtvonal, amely fiatal sertés csípőartériájának endotéliumából származik. A sejtvonal konfluenciáig növekedve tipikus macskaköves morfológiát mutat, és standard tenyésztési körülmények között adhezív monoréteget képez. A PIEC-ek megőrzik a legfontosabb endoteliális jellemzőket, beleértve a kontaktusgátlást, az endoteliális markerek, például a von Willebrand-faktor (vWF) expresszióját, valamint a megfelelő in vitro vizsgálatokban a kapilláris-szerű struktúrák kialakításának képességét. Vascularis eredetük miatt a PIEC-eket széles körben használják a sertés endoteliális biológiájának és a gazda-kórokozó interakcióknak a tanulmányozására.
Funkcionálisan a PIEC-ek a makrovaszkuláris endoteliális sejtekkel megegyező tulajdonságokat mutatnak, beleértve a gyulladásos ingerekre való reagálóképességet és a leukocita-toborzásban részt vevő adhéziós molekulák expressziójának képességét. Széles körben használják őket a virológiai kutatásokban, különösen a klasszikus sertéspestis vírus (CSFV), az afrikai sertéspestis vírus (ASFV) és a sertés reproduktív és légúti szindróma vírus (PRRSV) szaporodásának és tanulmányozásának céljára. Bizonyos vírusfertőzésekkel szembeni magas toleranciájuk és stabil növekedési jellemzőik értékes in vitro rendszert jelentenek a vírusreplikáció, az antivirális szűrés és a vakcina kutatások számára.
A fertőző betegségek alkalmazásain túl a PIEC-ek releváns nagyállat-endoteliális modellként szolgálnak a vaszkuláris barrier funkció, az endoteliális aktiváció, az angiogenezis és a gyulladásos jelátviteli útvonalak vizsgálatához. Sertésből származó endoteliális vonalként a PIEC-ek transzlációs relevanciát biztosítanak a komparatív kardiovaszkuláris kutatásokhoz és preklinikai vizsgálatokhoz, ahol általában sertésmodelleket alkalmaznak.
- Szövet
- Érrendszeri endothelium
02Osztályozás
- Organizmus
- Sertés
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelialis
04Azonosítók
- Hivatkozás
- PIEC (Cytion katalógusszám: 305213)
- NCBI adóazonosító szám
- 9823
- Cellosaurus
- CVCL_C0W5
05Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki hővel inaktivált 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
07Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen