Gå direkte til indholdet
Væv
Vaskulært endotel

Dokumenter

PIEC

Cell line · Varenummer 305213

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) er en spontant udødeliggjort endotelcellelinje, der stammer fra endotelet i iliacarterien hos et ungt svin. Cellelinjen udviser en typisk brostenmorfologi, når den dyrkes til konfluens, og danner adhærente monolag under standardkulturforhold. PIEC'er bevarer vigtige endotelkarakteristika, herunder kontaktinhibering, ekspression af endotelmarkører såsom von Willebrand-faktor (vWF) og evnen til at danne kapillærlignende strukturer i passende in vitro-assays. På grund af deres vaskulære oprindelse bruges PIEC'er i vid udstrækning som model til at studere svineendotelbiologi og interaktioner mellem vært og patogen.

Funktionelt udviser PIEC'er egenskaber, der svarer til makrovaskulære endotelceller, herunder reaktionsevne over for inflammatoriske stimuli og evnen til at udtrykke adhæsionsmolekyler, der er involveret i leukocytrekruttering. De er blevet udbredt anvendt i virologisk forskning, især til formering og undersøgelse af svinevirus såsom klassisk svinepestvirus (CSFV), afrikansk svinepestvirus (ASFV) og svine-reproduktions- og respirationssyndromvirus (PRRSV). Deres høje tolerancetilstand over for visse virusinfektioner og stabile vækstegenskaber gør dem til et værdifuldt in vitro-system til virusreplikationsundersøgelser, antiviral screening og vaccineforskning.

Ud over anvendelser inden for infektionssygdomme fungerer PIEC'er som en relevant endotelmodel for store dyr til undersøgelse af vaskulær barrierefunktion, endotelaktivering, angiogenese og inflammatoriske signalveje. Som en endotelcelle fra svin giver PIEC'er translationel relevans for komparativ kardiovaskulær forskning og prækliniske studier, hvor svinemodeller ofte anvendes.

Væv
Vaskulært endotel

02Klassificering

Organisme
Gris
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
PIEC (Cytion-katalognummer 305213)
NCBI-skattenummer
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med varmeinaktiveret 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.