Langsung ke isi
Tisu
Endotel pembuluh darah

Dokumen

PIEC

Cell line · Nomor produk 305213

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

PIEC (Sel Endotel Arteri Iliaca Babi) adalah garis sel endotel yang secara spontan menjadi abadi, yang berasal dari endotel arteri iliaca babi muda. Garis sel ini menunjukkan morfologi batu bata yang khas saat tumbuh hingga konfluensi dan membentuk lapisan tunggal yang melekat pada kondisi kultur standar. PIECs mempertahankan karakteristik endotelial utama, termasuk inhibisi kontak, ekspresi penanda endotelial seperti faktor von Willebrand (vWF), dan kemampuan untuk membentuk struktur kapiler-seperti dalam uji in vitro yang sesuai. Karena asal vaskularnya, PIECs secara luas digunakan sebagai model untuk mempelajari biologi endotelial babi dan interaksi tuan rumah-patogen.

Secara fungsional, PIECs menunjukkan karakteristik yang konsisten dengan sel endotel makrovaskular, termasuk respons terhadap stimulus inflamasi dan kemampuan untuk mengekspresikan molekul adhesi yang terlibat dalam rekrutmen leukosit. Mereka telah digunakan secara luas dalam penelitian virologi, terutama untuk propagasi dan studi virus babi seperti virus demam babi klasik (CSFV), virus demam babi Afrika (ASFV), dan virus sindrom reproduksi dan pernapasan babi (PRRSV). Kemampuan mereka yang tinggi untuk terinfeksi oleh infeksi virus tertentu dan karakteristik pertumbuhan yang stabil menjadikannya sistem in vitro yang berharga untuk studi replikasi virus, skrining antivirus, dan penelitian vaksin.

Di luar aplikasi penyakit menular, PIECs berfungsi sebagai model endotel hewan besar yang relevan untuk menyelidiki fungsi penghalang vaskular, aktivasi endotel, angiogenesis, dan jalur sinyal inflamasi. Sebagai garis sel endotel yang berasal dari babi, PIECs memberikan relevansi translasional untuk penelitian kardiovaskular komparatif dan studi praklinis di mana model babi sering digunakan.

Tisu
Endotel pembuluh darah

02Klasifikasi

Organisme
Babi
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
PIEC (nomor katalog Cytion 305213)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.