Skip to content
Tissue
เยื่อบุผนังหลอดเลือด

Documents

PIEC

Cell line · Product number 305213

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) เป็นสายพันธุ์เซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดที่เกิดการอมตะโดยธรรมชาติ ซึ่งสกัดจากเยื่อบุผนังหลอดเลือดแดงอิลิอักของสุกรอายุน้อย สายพันธุ์เซลล์นี้แสดงลักษณะรูปร่างแบบก้อนหินเมื่อเพาะเลี้ยงจนเต็มแผ่น และก่อตัวเป็นชั้นเดียวที่เกาะติดกันภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐาน PIECs ยังคงลักษณะสำคัญของเซลล์บุผนังหลอดเลือดชั้นใน (endothelial) ไว้ รวมถึงการยับยั้งการเจริญเติบโตเมื่อสัมผัสกับเซลล์ใกล้เคียง (contact inhibition) การแสดงออกของตัวบ่งชี้เซลล์บุผนังหลอดเลือด เช่น ปัจจัยวอน วิลเลบรานด์ (von Willebrand factor, vWF) และความสามารถในการสร้างโครงสร้างคล้ายหลอดเลือดฝอย (capillary-like structures) ในการทดสอบในหลอดทดลองที่เหมาะสม เนื่องจากมีต้นกำเนิดจากหลอดเลือด PIECs จึงถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์บุผนังหลอดเลือดในสุกรและปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค

ในเชิงหน้าที่ PIECs แสดงลักษณะที่สอดคล้องกับเซลล์เยื่อบุผิวหลอดเลือดขนาดใหญ่ รวมถึงการตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นการอักเสบและความสามารถในการแสดงโมเลกุลยึดเกาะที่เกี่ยวข้องกับการเรียกเซลล์เม็ดเลือดขาว พวกมันถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยด้านไวรัสวิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการเพาะเลี้ยงและศึกษาไวรัสในสุกร เช่น ไวรัสไข้หวัดหมูคลาสสิก (CSFV) ไวรัสไข้หวัดหมูแอฟริกา (ASFV) และไวรัสโรคระบบสืบพันธุ์และระบบทางเดินหายใจในสุกร (PRRSV) ความสามารถในการติดเชื้อไวรัสบางชนิดได้สูงและลักษณะการเจริญเติบโตที่เสถียรทำให้พวกมันเป็นระบบ in vitro ที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการจำลองไวรัส การคัดกรองสารต้านไวรัส และการวิจัยวัคซีน

นอกเหนือจากการประยุกต์ใช้ในโรคติดเชื้อ PIECs ยังทำหน้าที่เป็นแบบจำลองเยื่อบุผนังหลอดเลือดในสัตว์ขนาดใหญ่ที่เกี่ยวข้องสำหรับการศึกษาการทำงานของอุปสรรคหลอดเลือด การกระตุ้นเยื่อบุผนังหลอดเลือด การสร้างหลอดเลือดใหม่ และเส้นทางการส่งสัญญาณการอักเสบ ในฐานะที่เป็นสายพันธุ์เยื่อบุผนังหลอดเลือดที่ได้จากสุกร PIECs มีความเกี่ยวข้องในการแปลผลสำหรับการวิจัยทางหัวใจและหลอดเลือดเชิงเปรียบเทียบและการศึกษาทางคลินิกก่อนการทดลองที่ใช้แบบจำลองสุกรอย่างแพร่หลาย

Tissue
เยื่อบุผนังหลอดเลือด

02Classification

Organism
Pig
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
PIEC (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305213)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารเสริมในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย 10% FBS ที่ผ่านการทำให้ไม่มีความร้อน
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า