Gå til innholdet
Vev
Vaskulært endotel

Dokumenter

PIEC

Cell line · Produktnummer 305213

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) er en spontant immortalisert endotelcellelinje avledet fra endotelet i iliacarterien til en ung gris. Cellelinjen viser en typisk brosteinsmorfologi når den dyrkes til konfluens og danner vedheftende monolag under standard dyrkningsbetingelser. PIEC-celler beholder viktige endotelkarakteristika, inkludert kontaktinhibering, uttrykk for endotelmarkører som von Willebrand-faktor (vWF) og evnen til å danne kapillærlignende strukturer i passende in vitro-assays. På grunn av sin vaskulære opprinnelse brukes PIEC-celler mye som modell for å studere endotelbiologi hos svin og interaksjoner mellom vert og patogen.

Funksjonelt viser PIEC-celler egenskaper som er konsistente med makrovaskulære endotelceller, inkludert respons på inflammatoriske stimuli og evnen til å uttrykke adhesjonsmolekyler involvert i leukocyttrekruttering. De har blitt mye brukt i virologisk forskning, særlig for forplantning og studier av svinevirus som klassisk svinepestvirus (CSFV), afrikansk svinepestvirus (ASFV) og svine reproduktivt og respiratorisk syndromvirus (PRRSV). Deres høye toleranse for visse virusinfeksjoner og stabile vekstegenskaper gjør dem til et verdifullt in vitro-system for studier av virusreplikasjon, antiviral screening og vaksineforskning.

Utover anvendelser innen smittsomme sykdommer fungerer PIEC som en relevant endotelmodell for store dyr for å undersøke vaskulær barrierefunksjon, endotelaktivering, angiogenese og inflammatoriske signalveier. Som en endotelcelle fra svin gir PIEC translatorisk relevans for komparativ kardiovaskulær forskning og prekliniske studier hvor svinemodeller ofte benyttes.

Vev
Vaskulært endotel

02Klassifisering

Organisme
Gris
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
PIEC (Cytion-katalognummer 305213)
NCBI-skattenummer
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med varmeinaktivert 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.