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Tecido
Endotélio vascular

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PIEC

Cell line · Número do produto 305213

€800.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

PIEC (Células Endoteliais Ilíacas Suínas) é uma linha celular endotelial espontaneamente imortalizada derivada do endotélio da artéria ilíaca de um porco jovem. A linha celular exibe uma morfologia típica de paralelepípedos quando cultivada até a confluência e forma monocamadas aderentes em condições de cultura padrão. As PIECs mantêm características endoteliais essenciais, incluindo inibição de contacto, expressão de marcadores endoteliais, como o fator von Willebrand (vWF), e a capacidade de formar estruturas semelhantes a capilares em ensaios in vitro apropriados. Devido à sua origem vascular, as PIECs são amplamente utilizadas como modelo para estudar a biologia endotelial suína e as interações hospedeiro-patógeno.

Funcionalmente, as PIECs apresentam características consistentes com as células endoteliais macrovasculares, incluindo a capacidade de resposta a estímulos inflamatórios e a capacidade de expressar moléculas de adesão envolvidas no recrutamento de leucócitos. Elas têm sido amplamente utilizadas em pesquisas virológicas, particularmente para a propagação e estudo de vírus suínos, como o vírus da peste suína clássica (CSFV), o vírus da peste suína africana (ASFV) e o vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV). Sua alta permissividade a certas infecções virais e características de crescimento estável tornam-nas um sistema in vitro valioso para estudos de replicação viral, triagem antiviral e pesquisa de vacinas.

Além das aplicações em doenças infecciosas, as PIECs servem como um modelo endotelial relevante em animais de grande porte para investigar a função da barreira vascular, a ativação endotelial, a angiogénese e as vias de sinalização inflamatória. Como uma linha endotelial derivada de suínos, as PIECs fornecem relevância translacional para pesquisas cardiovasculares comparativas e estudos pré-clínicos, nos quais modelos suínos são comumente empregados.

Tecido
Endotélio vascular

02Classificação

Organismo
Porco
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
PIEC (número de catálogo da Cytion 305213)
Número de identificação fiscal do NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS ativado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.