Přejít na obsah
Tkáň
Cévní endotel

Dokumenty

PIEC

Cell line · Číslo výrobku 305213

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) je spontánně imortalizovaná endoteliální buněčná linie odvozená z endotelu iliakální tepny mladého prasete. Buněčná linie vykazuje typickou morfologii dlažebních kostek, když doroste do konfluence, a za standardních kultivačních podmínek tvoří adhezivní monovrstvy. PIEC si zachovávají klíčové endoteliální vlastnosti, včetně kontaktní inhibice, exprese endoteliálních markerů, jako je von Willebrandův faktor (vWF), a schopnosti tvořit kapilární struktury v příslušných in vitro testech. Vzhledem ke svému vaskulárnímu původu jsou PIEC široce používány jako model pro studium biologie prasečího endotelu a interakcí mezi hostitelem a patogenem.

Funkčně vykazují PIEC vlastnosti shodné s makrovaskulárními endoteliálními buňkami, včetně citlivosti na zánětlivé podněty a schopnosti exprimovat adhezní molekuly podílející se na rekrutaci leukocytů. Jsou široce využívány ve virologickém výzkumu, zejména pro množení a studium prasečích virů, jako je virus klasického moru prasat (CSFV), virus afrického moru prasat (ASFV) a virus reprodukčního a respiračního syndromu prasat (PRRSV). Jejich vysoká vnímavost k určitým virovým infekcím a stabilní růstové charakteristiky z nich činí cenný in vitro systém pro studie virové replikace, antivirové screeningy a výzkum vakcín.

Kromě aplikací v oblasti infekčních onemocnění slouží PIEC jako relevantní endoteliální model velkých zvířat pro výzkum funkce cévní bariéry, endoteliální aktivace, angiogeneze a zánětlivých signálních drah. Jako endoteliální linie pocházející z prasat poskytují PIEC translační relevanci pro komparativní kardiovaskulární výzkum a preklinické studie, kde se běžně používají prasečí modely.

Tkáň
Cévní endotel

02Klasifikace

Organismus
Prase
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
PIEC (katalogové číslo Cytion 305213)
Daňové identifikační číslo NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium tepelně aktivovaným 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.