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血管内皮

PIEC

Cell line · 製品番号 305213

€800.00税・送料別

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1

01概要

説明

PIEC(ブタ腸骨動脈内皮細胞)は、若齢ブタの腸骨動脈内皮由来の自然不死化内皮細胞株である。本細胞株は、標準培養条件下で増殖により密接状態に達すると典型的な石畳様形態を示し、接着性単層を形成する。 PIECは接触抑制、フォン・ヴィレブランド因子(vWF)などの内皮マーカー発現、適切なin vitroアッセイにおける毛細血管様構造形成能など、主要な内皮細胞特性を保持している。血管起源であることから、PIECはブタ内皮生物学および宿主-病原体相互作用の研究モデルとして広く利用されている。

機能的には、PIECsは炎症性刺激への反応性や白血球動員に関与する接着分子の発現能力など、大血管内皮細胞と一致する特徴を示す。 これらはウイルス学研究、特に古典豚熱ウイルス(CSFV)、アフリカ豚熱ウイルス(ASFV)、豚生殖器呼吸器症候群ウイルス(PRRSV)などの豚ウイルス増殖・研究において広く利用されてきた。特定のウイルス感染に対する高い感受性と安定した増殖特性により、ウイルス複製研究、抗ウイルススクリーニング、ワクチン研究のための貴重なin vitroシステムとなっている。

感染症応用を超えて、PIECは血管バリア機能、内皮活性化、血管新生、炎症性シグナル伝達経路を調査するための関連性の高い大型動物内皮モデルとして機能する。豚由来内皮細胞株として、PIECは比較心血管研究や前臨床研究において、豚モデルが一般的に用いられる場合に、トランスレーショナルな関連性を提供する。

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血管内皮

02分類

生物
ブタ
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮

04識別子

引用
PIEC(Cytionカタログ番号 305213)
NCBI 納税者番号
9823
セロサウルス
CVCL_C0W5

05取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に熱不活性化10% FBSを加える。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。