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Tissue
血管內皮

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PIEC

Cell line · Product number 305213

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

PIEC(豬髂動脈內皮細胞)是一種源自年輕豬髂動脈內皮的自發性不朽化內皮細胞系。該細胞系在培養至細胞融合時呈現典型的鵝卵石狀形態,並在標準培養條件下形成黏附性單層。 PIEC 保留了關鍵的內皮細胞特徵,包括接觸抑制、表達馮·威勒布蘭德因子(vWF)等內皮標記物,以及在適當的體外實驗中形成毛細血管樣結構的能力。由於其血管來源,PIEC 被廣泛用作研究豬內皮細胞生物學及宿主-病原體相互作用的模型。

在功能方面,PIECs 展現出與大血管內皮細胞一致的特徵,包括對炎症刺激的反應性,以及表達參與白細胞招募的黏附分子的能力。 它們已被廣泛應用於病毒學研究,特別是經典豬瘟病毒(CSFV)、非洲豬瘟病毒(ASFV)及豬繁殖與呼吸綜合症病毒(PRRSV)等豬病毒的培養與研究。 其對特定病毒感染的高易感性及穩定的生長特性,使其成為病毒複製研究、抗病毒篩選及疫苗研究中極具價值的體外系統。

除了在傳染病領域的應用外,PIECs 還作為一種相關的大型動物內皮細胞模型,用於研究血管屏障功能、內皮細胞活化、血管新生及發炎訊號傳導路徑。作為一種源自豬的內皮細胞系,PIECs 為常使用豬模型的比較心血管研究及臨床前研究提供了轉譯相關性。

Tissue
血管內皮

02Classification

Organism
Pig
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮性

04Identifiers

Citation
PIEC(Cytion 型號 305213)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入經熱滅活的 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。