Gå direkt till innehållet
Vävnad
Vaskulärt endotel

PIEC

Cell line · Produktnummer 305213

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) är en spontant odödliggjord endotelcellinje som härrör från endotelet i iliacarterien hos en ung gris. Cellinjen uppvisar en typisk kulstensmorfologi när den odlas till konfluens och bildar vidhäftande monolager under standardodlingsförhållanden. PIEC behåller viktiga endotelegenskaper, inklusive kontaktinhibering, uttryck av endotelmarkörer såsom von Willebrand-faktor (vWF) och förmågan att bilda kapillärliknande strukturer i lämpliga in vitro-analyser. På grund av sitt vaskulära ursprung används PIEC ofta som modell för att studera endotelbiologi hos svin och interaktioner mellan värd och patogen.

Funktionellt uppvisar PIEC egenskaper som överensstämmer med makrovaskulära endotelceller, inklusive respons på inflammatoriska stimuli och förmåga att uttrycka adhesionsmolekyler som är involverade i rekrytering av leukocyter. De har använts i stor utsträckning inom virologisk forskning, särskilt för förökning och studier av svinvirus såsom klassisk svinpestvirus (CSFV), afrikansk svinpestvirus (ASFV) och viruset som orsakar reproduktions- och respiratoriskt syndrom hos svin (PRRSV). Deras höga mottaglighet för vissa virusinfektioner och stabila tillväxtegenskaper gör dem till ett värdefullt in vitro-system för studier av virusreplikation, antiviral screening och vaccinforskning.

Utöver tillämpningar inom infektionssjukdomar fungerar PIEC som en relevant endotelmodell för stora djur för att undersöka vaskulär barriärfunktion, endotelaktivering, angiogenes och inflammatoriska signalvägar. Som en endotelcellinje härrörande från svin ger PIEC translationell relevans för jämförande kardiovaskulär forskning och prekliniska studier där svinmodeller vanligtvis används.

Vävnad
Vaskulärt endotel

02Klassificering

Organism
Gris
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
PIEC (Cytion katalognummer 305213)
NCBI-skattenummer
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med värmeinaktiverad 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.