Prejsť na obsah
Tkanivo
Cievny endotel

Dokumenty

PIEC

Cell line · Číslo výrobku 305213

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) je spontánne imortalizovaná endoteliálna bunka odvodená z endotelu iliakálnej artérie mladého prasaťa. Bunka vykazuje typickú morfológiu dlažobných kameňov, keď dorastie do konfluencie, a za štandardných kultivačných podmienok tvorí adhezívne monovrstvy. PIEC si zachovávajú kľúčové endoteliálne charakteristiky, vrátane kontaktnej inhibície, expresie endoteliálnych markerov, ako je von Willebrandov faktor (vWF), a schopnosti vytvárať kapilárne štruktúry v príslušných in vitro testoch. Vzhľadom na svoj vaskulárny pôvod sa PIEC široko používajú ako model na štúdium biológie endotelu ošípaných a interakcií medzi hostiteľom a patogénom.

Funkčne PIEC vykazujú vlastnosti zodpovedajúce makrovaskulárnym endoteliálnym bunkám, vrátane citlivosti na zápalové podnety a schopnosti exprimovať adhézne molekuly podieľajúce sa na nábore leukocytov. Sú široko využívané vo virologickom výskume, najmä na šírenie a štúdium vírusov ošípaných, ako je vírus klasického moru ošípaných (CSFV), vírus afrického moru ošípaných (ASFV) a vírus reprodukčného a respiračného syndrómu ošípaných (PRRSV). Ich vysoká tolerancia voči určitým vírusovým infekciám a stabilné rastové charakteristiky z nich robia cenný in vitro systém pre štúdium vírusovej replikácie, antivírusové skríningy a výskum vakcín.

Okrem aplikácií v oblasti infekčných chorôb slúžia PIEC ako relevantný endoteliálny model veľkých zvierat na skúmanie funkcie cievnej bariéry, endoteliálnej aktivácie, angiogenézy a zápalových signálnych dráh. Ako endoteliálna línia pochádzajúca z ošípaných poskytujú PIEC translačnú relevanciu pre komparatívny kardiovaskulárny výskum a predklinické štúdie, kde sa bežne používajú modely ošípaných.

Tkanivo
Cievny endotel

02Klasifikácia

Organizmus
Prase
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
PIEC (katalógové číslo Cytion 305213)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium tepelne aktivovaným 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.