Skip to content
Tissue
Lớp nội mạc mạch máu

Documents

PIEC

Cell line · Product number 305213

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

PIEC (Tế bào nội mô động mạch chậu lợn) là dòng tế bào nội mô được bất tử hóa tự nhiên, được phân lập từ nội mô động mạch chậu của lợn con. Dòng tế bào này có hình thái đặc trưng dạng gạch lát khi phát triển đến mật độ tối đa và tạo thành lớp đơn bám dính dưới điều kiện nuôi cấy tiêu chuẩn. PIECs duy trì các đặc tính nội mô quan trọng, bao gồm ức chế tiếp xúc, biểu hiện các dấu hiệu nội mô như yếu tố von Willebrand (vWF) và khả năng hình thành các cấu trúc tương tự mao mạch trong các thử nghiệm in vitro phù hợp. Do nguồn gốc mạch máu của chúng, PIECs được sử dụng rộng rãi như một mô hình để nghiên cứu sinh học nội mô lợn và tương tác giữa vật chủ và tác nhân gây bệnh.

Về mặt chức năng, PIECs thể hiện các đặc điểm tương tự như tế bào nội mô mạch máu lớn, bao gồm khả năng phản ứng với các kích thích viêm và khả năng biểu hiện các phân tử kết dính tham gia vào quá trình thu hút bạch cầu. Chúng đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu vi rút học, đặc biệt là cho việc nhân lên và nghiên cứu các vi rút lợn như vi rút sốt lợn cổ điển (CSFV), vi rút sốt lợn châu Phi (ASFV) và vi rút hội chứng hô hấp và sinh sản lợn (PRRSV). Khả năng cho phép nhiễm vi rút cao đối với một số loại vi rút và đặc tính tăng trưởng ổn định khiến chúng trở thành hệ thống in vitro quý giá cho các nghiên cứu về nhân lên vi rút, sàng lọc kháng vi rút và nghiên cứu vắc-xin.

Ngoài các ứng dụng trong bệnh truyền nhiễm, PIECs còn là mô hình nội mô động vật lớn phù hợp để nghiên cứu chức năng hàng rào mạch máu, kích hoạt nội mô, tạo mạch máu và các con đường tín hiệu viêm. Là dòng tế bào nội mô có nguồn gốc từ lợn, PIECs cung cấp tính ứng dụng lâm sàng cho nghiên cứu so sánh về tim mạch và các nghiên cứu tiền lâm sàng nơi mô hình lợn thường được sử dụng.

Tissue
Lớp nội mạc mạch máu

02Classification

Organism
Pig
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì

04Identifiers

Citation
PIEC (Mã sản phẩm Cytion: 305213)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò đã được bất hoạt bằng nhiệt
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.