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Tessuto
Endotelio vascolare

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PIEC

Cell line · Codice prodotto 305213

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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1

01Informazioni generali

Descrizione

PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) è una linea cellulare endoteliale immortalizzata spontaneamente derivata dall'endotelio dell'arteria iliaca di un maiale giovane. La linea cellulare presenta una morfologia tipica a ciottoli quando cresce fino alla confluenza e forma monostrati aderenti in condizioni di coltura standard. Le PIEC conservano caratteristiche endoteliali fondamentali, tra cui l'inibizione da contatto, l'espressione di marcatori endoteliali come il fattore von Willebrand (vWF) e la capacità di formare strutture simili a capillari in appropriati test in vitro. Grazie alla loro origine vascolare, le PIEC sono ampiamente utilizzate come modello per lo studio della biologia endoteliale suina e delle interazioni ospite-patogeno.

Dal punto di vista funzionale, le PIEC mostrano caratteristiche coerenti con le cellule endoteliali macrovascolari, tra cui la reattività agli stimoli infiammatori e la capacità di esprimere molecole di adesione coinvolte nel reclutamento dei leucociti. Sono state ampiamente utilizzate nella ricerca virologica, in particolare per la propagazione e lo studio di virus suini come il virus della peste suina classica (CSFV), il virus della peste suina africana (ASFV) e il virus della sindrome riproduttiva e respiratoria suina (PRRSV). La loro elevata permissività a determinate infezioni virali e le caratteristiche di crescita stabile li rendono un prezioso sistema in vitro per studi sulla replicazione virale, screening antivirale e ricerca sui vaccini.

Oltre alle applicazioni nel campo delle malattie infettive, le PIEC fungono da modello endoteliale di grandi animali per lo studio della funzione di barriera vascolare, dell'attivazione endoteliale, dell'angiogenesi e delle vie di segnalazione infiammatorie. In quanto linea endoteliale di origine suina, le PIEC forniscono rilevanza traslazionale per la ricerca cardiovascolare comparativa e gli studi preclinici in cui vengono comunemente utilizzati modelli suini.

Tessuto
Endotelio vascolare

02Classificazione

Organismo
Maiale
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
PIEC (numero di catalogo Cytion 305213)
Codice fiscale NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_C0W5

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.