Tartalomra ugrás
HC11
Szövet
Emlő
Szinonimák
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Dokumentumok

HC11

Cell line · Termékszám 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HC11 sejtvonal, amely a COMMA-1D szülői sejtvonalból származó klón, egy olyan epitélsejtvonal, amely egy középterhes BALB/c egér emlőmirigyéből származik. Ezt a klónt transzfekcióval izolálták, és ezt követően szelektálták a béta-kazein fehérje prolaktin hatására történő indukálására való képessége alapján. Modellként a HC11 különösen a prolaktinra és más laktogén hormonokra, mint az inzulin és a dexametazon, amelyek elősegítik a tejfehérjék, például a béta-kazein termelését, való érzékenységét.

A sejtek viselkedését és jellemzőit tekintve a HC11 sejtek képesek differenciálódni olyan tenyésztési körülmények között, amelyek nem igénylik komplex extracelluláris mátrix hozzáadását vagy más sejttípusokkal való együtttenyésztést. Ez leegyszerűsíti a HC11 sejtek felhasználását különböző kísérleti elrendezésekben, az emlőmirigy működésének és fejlődésének sejtmechanizmusaira összpontosítva. A HC11 sejtek autonóm módon termelnek kulcsfontosságú extracelluláris mátrix fehérjéket, köztük laminint, amelyek létfontosságúak a sejtek szerkezetéhez és működéséhez. A HC11 sejtek génexpressziós profilja differenciálódási állapotukkal változik: a differenciálatlan sejtek olyan géneket fejeznek ki, mint az Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 és ler3, míg a differenciált sejtek az Id1-et expresszálják, ami rávilágít az emlőhámsejtek differenciálódásával kapcsolatos dinamikus génexpressziós változásokra.

Szövet
Emlő
Szinonimák
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Kettőzési idő
50-80 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HC11 (Cytion katalógusszám: 305050)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
BALB/c
Az adományozó életkora
1 év