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HC11
Tecido
Mamária
Sinónimos
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Documentos

HC11

Cell line · Número do produto 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HC11, um clone derivado da linha celular parental COMMA-1D, é uma linha celular epitelial proveniente da glândula mamária de um ratinho BALB/c em plena gestação. Este clone específico foi isolado através de transfecção e foi subsequentemente selecionado pela sua capacidade de induzir a proteína beta-caseína em resposta à prolactina. Como modelo, o HC11 é particularmente conhecido pela sua capacidade de resposta à prolactina e a outras hormonas lactogénicas, como a insulina e a dexametasona, que facilitam a produção de proteínas do leite, como a beta-caseína.

Em termos de comportamento e caraterísticas celulares, as células HC11 são capazes de se diferenciar em condições de cultura que não requerem a adição de uma matriz extracelular complexa ou a co-cultura com outros tipos de células. Este facto simplifica a utilização das células HC11 em várias configurações experimentais, centrando-se nos mecanismos celulares da função e desenvolvimento da glândula mamária. Em particular, as células HC11 produzem autonomamente proteínas-chave da matriz extracelular, incluindo a laminina, que são cruciais para a sua estrutura e função. O perfil de expressão génica das células HC11 varia com o seu estado de diferenciação: as células indiferenciadas expressam genes como Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 e ler3, enquanto as células diferenciadas expressam Id1, realçando as alterações dinâmicas na expressão génica associadas à diferenciação das células epiteliais mamárias.

Tecido
Mamária
Sinónimos
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tempo de duplicação
50 a 80 horas

04Identificadores

Referência
HC11 (número de catálogo da Cytion 305050)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
1 ano