Prejsť na obsah
HC11
Tkanivo
Mliečna žľaza
Synonymá
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Dokumenty

HC11

Cell line · Číslo výrobku 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia HC11, klon odvodený od rodičovskej bunkovej línie COMMA-1D, je epitelová bunková línia pochádzajúca z mliečnej žľazy myší BALB/c v strednej fáze gravidity. Tento konkrétny klon bol izolovaný transfekciou a následne bol vybraný pre svoju schopnosť indukovať proteín beta-kazeín v reakcii na prolaktín. Ako model sa HC11 vyznačuje najmä svojou citlivosťou na prolaktín a iné laktogénne hormóny, ako je inzulín a dexametazón, ktoré uľahčujú produkciu mliečnych bielkovín, ako je beta-kaseín.

Pokiaľ ide o bunkové správanie a vlastnosti, bunky HC11 sú schopné diferenciácie v kultivačných podmienkach, ktoré nevyžadujú pridanie komplexnej extracelulárnej matrice alebo spoločnú kultiváciu s inými typmi buniek. To zjednodušuje použitie buniek HC11 v rôznych experimentálnych zostavách zameraných na bunkové mechanizmy funkcie a vývoja mliečnej žľazy. Bunky HC11 autonómne produkujú kľúčové proteíny extracelulárnej matrice vrátane laminínu, ktoré sú kľúčové pre ich štruktúru a funkciu. Profil génovej expresie buniek HC11 sa mení v závislosti od ich diferenciácie: nediferencované bunky exprimujú gény ako Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 a ler3, zatiaľ čo diferencované bunky exprimujú Id1, čo poukazuje na dynamické zmeny génovej expresie spojené s diferenciáciou buniek mliečneho epitelu.

Tkanivo
Mliečna žľaza
Synonymá
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Doba zdvojnásobenia
50 až 80 hodín

04Identifikátory

Citácia
HC11 (katalógové číslo Cytion 305050)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
BALB/c
Vek darcu
1 rok