Preskoči na vsebino
HC11
Tkivo
Mlečna žleza
Sinonimi
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Dokumenti

HC11

Cell line · Številka izdelka 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HC11, klon, pridobljen iz starševske celične linije COMMA-1D, je epitelijska celična linija, pridobljena iz mlečne žleze srednje breje miši BALB/c. Ta klon je bil izoliran s transfekcijo in nato izbran zaradi sposobnosti indukcije beljakovine betakazeina kot odziva na prolaktin. Kot model je HC11 še posebej pomemben zaradi svoje odzivnosti na prolaktin in druge laktogene hormone, kot sta inzulin in deksametazon, ki pospešujejo proizvodnjo mlečnih beljakovin, kot je betakazein.

Glede celičnega obnašanja in značilnosti so celice HC11 sposobne diferenciacije v pogojih gojenja, ki ne zahtevajo dodajanja zapletenega zunajceličnega matriksa ali sočasnega gojenja z drugimi vrstami celic. To poenostavlja uporabo celic HC11 v različnih eksperimentalnih postavitvah, ki se osredotočajo na celične mehanizme delovanja in razvoja mlečne žleze. Celice HC11 avtonomno proizvajajo ključne beljakovine zunajceličnega matriksa, vključno z lamininom, ki so ključnega pomena za njihovo strukturo in delovanje. Profil izražanja genov celic HC11 se spreminja glede na njihovo diferenciacijo: nediferencirane celice izražajo gene, kot so Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 in ler3, medtem ko diferencirane celice izražajo Id1, kar kaže na dinamične spremembe v izražanju genov, povezane z diferenciacijo epitelijskih celic dojk.

Tkivo
Mlečna žleza
Sinonimi
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Čas podvojitve
50 do 80 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HC11 (kataloška številka Cytion 305050)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
1 leto