Przejdź do treści
HC11
Chusteczka
Ssak
Synonimy
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Dokumenty

HC11

Cell line · Numer produktu 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HC11, klon pochodzący z macierzystej linii komórkowej COMMA-1D, jest nabłonkową linią komórkową pochodzącą z gruczołu sutkowego myszy BALB/c w połowie ciąży. Ten konkretny klon został wyizolowany poprzez transfekcję, a następnie został wybrany ze względu na jego zdolność do indukowania białka beta-kazeiny w odpowiedzi na prolaktynę. Jako model, HC11 jest szczególnie znany ze swojej wrażliwości na prolaktynę i inne hormony laktogenne, takie jak insulina i deksametazon, które ułatwiają produkcję białek mleka, takich jak beta-kazeina.

Pod względem zachowania i charakterystyki komórkowej, komórki HC11 są zdolne do różnicowania w warunkach hodowli, które nie wymagają dodawania złożonej macierzy zewnątrzkomórkowej lub współhodowli z innymi typami komórek. Upraszcza to wykorzystanie komórek HC11 w różnych konfiguracjach eksperymentalnych, koncentrując się na komórkowych mechanizmach funkcjonowania i rozwoju gruczołu sutkowego. Warto zauważyć, że komórki HC11 autonomicznie wytwarzają kluczowe białka macierzy zewnątrzkomórkowej, w tym lamininę, które są kluczowe dla ich struktury i funkcji. Profil ekspresji genów komórek HC11 różni się w zależności od ich stanu zróżnicowania: niezróżnicowane komórki wyrażają geny takie jak Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 i ler3, podczas gdy zróżnicowane komórki wyrażają Id1, podkreślając dynamiczne zmiany w ekspresji genów związane z różnicowaniem komórek nabłonka sutka.

Chusteczka
Ssak
Synonimy
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Czas podwojenia
50 do 80 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HC11 (numer katalogowy Cytion 305050)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c
Wiek dawcy
1 rok