Pāriet uz saturu
HC11
Audums
Krūts dziedzeris
Sinonīmi
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Dokumenti

HC11

Cell line · Preces numurs 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HC11 šūnu līnija, klons, kas atvasināts no COMMA-1D vecāku šūnu līnijas, ir epitēlija šūnu līnija, kas iegūta no vidēji grūtniecīgas BALB/c peles piena dziedzera. Šis konkrētais klons tika izolēts ar transfekcijas metodi un pēc tam atlasīts pēc tā spējas inducēt beta-kazeīna proteīnu, reaģējot uz prolaktīnu. HC11 kā modelis īpaši izceļas ar spēju reaģēt uz prolaktīnu un citiem laktogēniem hormoniem, piemēram, insulīnu un deksametazonu, kas veicina piena olbaltumvielu, piemēram, beta-kazeīna, ražošanu.

Attiecībā uz šūnu uzvedību un īpašībām HC11 šūnas spēj diferencēties kultūras apstākļos, kuros nav nepieciešams pievienot sarežģītu ekstracelulāro matricu vai kopkultūru ar citiem šūnu tipiem. Tas atvieglo HC11 šūnu izmantošanu dažādās eksperimentālās iekārtās, koncentrējoties uz piena dziedzera funkciju un attīstības šūnu mehānismiem. HC11 šūnas autonomi ražo galvenos āršūnu matriksa proteīnus, tostarp lamīnu, kas ir būtiski svarīgi to struktūrai un funkcijām. HC11 šūnu gēnu ekspresijas profils mainās atkarībā no to diferenciācijas stāvokļa: nediferencētas šūnas ekspresē tādus gēnus kā Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 un ler3, savukārt diferencētas šūnas ekspresē Id1, tādējādi uzsverot ar piena epitēlija šūnu diferenciāciju saistītās gēnu ekspresijas dinamiskās izmaiņas.

Audums
Krūts dziedzeris
Sinonīmi
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
50 līdz 80 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HC11 (Cytion kataloga numurs 305050)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c
Donora vecums
1 gads