Vai al contenuto
HC11
Tessuto
Mammario
Sinonimi
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Documenti

HC11

Cell line · Codice prodotto 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HC11, un clone derivato dalla linea cellulare parentale COMMA-1D, è una linea cellulare epiteliale ottenuta dalla ghiandola mammaria di un topo BALB/c a metà gravidanza. Questo particolare clone è stato isolato mediante trasfezione ed è stato successivamente selezionato per la sua capacità di indurre la proteina beta-caseina in risposta alla prolattina. Come modello, HC11 è particolarmente noto per la sua reattività alla prolattina e ad altri ormoni lattogeni come l'insulina e il desametasone, che facilitano la produzione di proteine del latte come la beta-caseina.

In termini di comportamento e caratteristiche cellulari, le cellule HC11 sono in grado di differenziarsi in condizioni di coltura che non richiedono l'aggiunta di una matrice extracellulare complessa o la co-coltura con altri tipi di cellule. Ciò semplifica l'uso delle cellule HC11 in vari setup sperimentali, incentrati sui meccanismi cellulari della funzione e dello sviluppo della ghiandola mammaria. In particolare, le cellule HC11 producono autonomamente proteine chiave della matrice extracellulare, tra cui la laminina, che sono fondamentali per la loro struttura e funzione. Il profilo di espressione genica delle cellule HC11 varia in base al loro stato di differenziazione: le cellule indifferenziate esprimono geni come Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 e ler3, mentre le cellule differenziate esprimono Id1, evidenziando i cambiamenti dinamici nell'espressione genica associati alla differenziazione delle cellule epiteliali mammarie.

Tessuto
Mammario
Sinonimi
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tempo di raddoppio
da 50 a 80 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HC11 (numero di catalogo Cytion 305050)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
BALB/c
Età dei donatori
1 anno