الانتقال إلى المحتوى
HC11
الأنسجة
الثدي
المرادفات
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

المستندات

HC11

Cell line · رقم المنتج 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا HC11، وهو مستنسخ مشتق من خط الخلايا الأبوية COMMA-1D، هو خط خلايا طلائية مأخوذ من الغدة الثديية لفأر BALB/C في منتصف الحمل. وقد تم عزل هذا المستنسخ الخاص من خلال عملية نقل الدم وتم اختياره لاحقًا لقدرته على تحفيز بروتين بيتا كازين استجابةً للبرولاكتين. وكنموذج، يُعرف HC11 بشكل خاص باستجابته للبرولاكتين والهرمونات اللبنية الأخرى مثل الأنسولين والديكساميثازون، والتي تسهل إنتاج بروتينات الحليب مثل بيتا كازين.

فيما يتعلق بالسلوك الخلوي والخصائص الخلوية، فإن خلايا HC11 قادرة على التمايز في ظروف الاستزراع التي لا تتطلب إضافة مصفوفة معقدة خارج الخلية أو زراعة مشتركة مع أنواع الخلايا الأخرى. يبسط هذا الأمر استخدام خلايا HC11 في إعدادات تجريبية مختلفة، مع التركيز على الآليات الخلوية لوظيفة الغدة الثديية وتطورها. وتجدر الإشارة إلى أن خلايا HC11 تنتج بشكل مستقل بروتينات المصفوفة خارج الخلية الرئيسية، بما في ذلك اللامينين، والتي تعتبر حاسمة بالنسبة إلى بنيتها ووظيفتها. يختلف ملف التعبير الجيني لخلايا HC11 باختلاف حالة تمايزها: تعبر الخلايا غير المتمايزة عن جينات مثل Lgals1 وRan وJam-A وBmpr1a وNfkbiz وTrip 1 وRps21 وLer3، بينما تعبر الخلايا المتمايزة عن Id1، مما يسلط الضوء على التغيرات الديناميكية في التعبير الجيني المرتبط بتمايز الخلايا الظهارية الثديية.

الأنسجة
الثدي
المرادفات
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
زمن المضاعفة
50 إلى 80 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HC11 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305050)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0288

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج
عمر المتبرع
1 سنة