Mine otse sisu juurde
HC11
Kude
Rinnanäärme
Sünonüümid
HC-11, HC11 Mammary Epithelium

Dokumendid

HC11

Cell line · Toote number 305050

The HC11 cell line, a clone derived from the COMMA-1D parental cell line, is an epithelial cell line sourced from the mammary gland of a mid-pregnant BALB...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HC11 rakuliin, mis on COMMA-1D vanemrakuliinist saadud kloon, on epiteelirakuliin, mis on pärit keset tiinust BALB/c hiire rinnanäärmest. See konkreetne kloon isoleeriti transfektsiooni teel ja seejärel selekteeriti selle võime järgi indutseerida beeta-kaseiini valku vastusena prolaktiinile. Mudelina on HC11 eriti tuntud selle poolest, et ta reageerib prolaktiinile ja teistele laktogeensetele hormoonidele, nagu insuliin ja deksametasoon, mis soodustavad piimavalkude, näiteks beeta-kaseiini tootmist.

Rakkude käitumise ja omaduste poolest on HC11 rakud võimelised diferentseeruma kultuuritingimustes, mis ei nõua keerulise rakuvälise maatriksi lisamist ega kooskultuurimist teiste rakutüüpidega. See lihtsustab HC11 rakkude kasutamist erinevates katsekomplektides, keskendudes rinnanäärme funktsiooni ja arengu rakumehhanismidele. Eelkõige toodavad HC11 rakud iseseisvalt olulisi rakuvälise maatriksi valke, sealhulgas laminiine, mis on nende struktuuri ja funktsiooni jaoks olulised. HC11 rakkude geeniekspressiooniprofiil varieerub vastavalt nende diferentseerumise seisundile: diferentseerumata rakud ekspresseerivad selliseid geene nagu Lgals1, Ran, Jam-A, Bmpr1a, Nfkbiz, Trib 1, Rps21 ja ler3, samas kui diferentseerunud rakud ekspresseerivad Id1, rõhutades rinnapiirkonna epiteelirakkude diferentseerumisega seotud dünaamilisi muutusi geeniekspressioonis.

Kude
Rinnanäärme
Sünonüümid
  • HC-11
  • HC11 Mammary Epithelium

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
50 kuni 80 tundi

04Tunnused

Viide
HC11 (Cytioni katalooginumber 305050)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0288

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
1 aasta