Tartalomra ugrás
HEL
Szövet
Perifériás vér
Betegség
Erythroleukémia
Szinonimák
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumentumok

HEL

Cell line · Termékszám 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HEL-sejtek egy emberi eritroliukémiás sejtvonal, amelyet egy 30 éves, 1980-ban Hodgkin-limfóma kezelése után kiújuló eritroliukémiában szenvedő férfi perifériás véréből állítottak elő.

A HEL-sejtek spontán és indukált globinszintézisre képesek, főként G-gamma és A-gamma láncokat termelnek. Ezek a sejtek embrionális láncokat (epsilon, zéta) és alfa láncokat is kifejeznek minimális mennyiségben, míg a béta láncok nem mutathatók ki.

A HEL-sejtek kerek, nagy vagy esetenként óriás, polinukleáris, szuszpenzióban lévő egysejtűek, néhány sejt megtapad. A mutáns JAK2 expresszióját RT-PCR és szekvenálással igazolták ezekben a sejtekben. A HEL-sejtek számos sejtfelszíni markert expresszálnak, többek között CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ és CD235a+. A kutatások szerint a hidroxikarbamid, egy olyan gyógyszer, amelyet rutinszerűen alkalmaznak számos rákos megbetegedés, többek között az eritroliukémia kezelésére, szintén szabályozhatja a HEL-sejtek pusztulását.

A hidroxikarbamid által kiváltott HEL-sejt apoptózis a HEL-sejtek terminális differenciálódásához kapcsolódhat. Emellett korábbi kutatások kimutatták, hogy a hidroxikarbamid döntő szerepet játszhat a HEL-sejtek proliferációjának és differenciálódásának szabályozásában.

Szövet
Perifériás vér
Betegség
Erythroleukémia
Szinonimák
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Kerekített
Kettőzési idő
36 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HEL (Cytion katalógusszám: 305022)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
30 év
Etnikai hovatartozás
Európai