Przejdź do treści
HEL
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Erytroleukemia
Synonimy
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumenty

HEL

Cell line · Numer produktu 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki HEL to ludzka linia komórkowa erytroleukemii, która została utworzona z krwi obwodowej 30-letniego mężczyzny z erytroleukemią w nawrocie po leczeniu chłoniaka Hodgkina w 1980 roku.

Komórki HEL są zdolne do spontanicznej i indukowanej syntezy globiny, wytwarzając głównie łańcuchy G gamma i A gamma. Komórki te wyrażają również łańcuchy embrionalne (epsilon, zeta) i łańcuchy alfa w minimalnych ilościach, podczas gdy łańcuchy beta są niewykrywalne.

Komórki HEL są okrągłymi, dużymi lub czasami olbrzymimi wielojądrzastymi, pojedynczymi komórkami w zawiesinie, z kilkoma komórkami przylegającymi. Ekspresja zmutowanego JAK2 została potwierdzona w tych komórkach za pomocą RT-PCR i sekwencjonowania. Komórki HEL wykazują ekspresję kilku markerów powierzchniowych, w tym CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ i CD235a+. Według badań, hydroksymocznik, lek rutynowo stosowany w leczeniu różnych nowotworów, w tym erytroleukemii, może również regulować śmierć komórek HEL.

Apoptoza komórek HEL wywołana przez hydroksymocznik może być związana z końcowym różnicowaniem komórek HEL. Ponadto wcześniejsze badania wykazały, że hydroksymocznik może mieć kluczowe znaczenie w kontrolowaniu proliferacji i różnicowania komórek HEL.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Erytroleukemia
Synonimy
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Zaokrąglony
Czas podwojenia
36 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HEL (numer katalogowy Cytion 305022)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
30 lat
Pochodzenie etniczne
Europejski