Ga naar de inhoud
HEL
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Erytroleukemie
Synoniemen
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Documenten

HEL

Cell line · Productnummer 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HEL-cellen zijn een menselijke erytroleukemiecellijn die werd aangemaakt uit het perifere bloed van een 30-jarige man met erytroleukemie in recidief na een behandeling voor Hodgkinlymfoom in 1980.

HEL-cellen zijn in staat tot spontane en geïnduceerde globinesynthese en produceren voornamelijk G gamma- en A gamma-ketens. Deze cellen brengen ook embryonale ketens (epsilon, zeta) en alfaketens in minimale hoeveelheden tot expressie, terwijl bètaketens niet detecteerbaar zijn.

HEL-cellen zijn ronde, grote tot soms reusachtige polynucleaire, enkele cellen in suspensie, met een paar aanhangende cellen. De expressie van gemuteerd JAK2 is bevestigd in deze cellen door RT-PCR en sequencing. HEL-cellen brengen verschillende celoppervlakmarkers tot expressie, waaronder CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+, en CD235a+. Volgens onderzoek kan hydroxyurea, een medicijn dat routinematig gebruikt wordt voor de behandeling van verschillende soorten kanker, waaronder erytroleukemie, ook de dood van HEL-cellen reguleren.

Apoptose van HEL-cellen door hydroxyureum kan verband houden met de einddifferentiatie van HEL-cellen. Daarnaast heeft eerder onderzoek aangetoond dat hydroxyureum cruciaal kan zijn bij het controleren van de HEL-celproliferatie en -differentiatie.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Erytroleukemie
Synoniemen
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Afgerond
Verdubbelingstijd
36 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HEL (Cytion catalogusnummer 305022)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen combineren en centrifugeren. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
30 jaar
Etnische afkomst
Europese