Μετάβαση στο περιεχόμενο
HEL
Ιστός
Περιφερικό αίμα
Ασθένεια
Ερυθρολευχαιμία
Συνώνυμα
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Έγγραφα

HEL

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα HEL είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά ερυθρολευχαιμίας που δημιουργήθηκε από το περιφερικό αίμα ενός 30χρονου άνδρα με ερυθρολευχαιμία σε υποτροπή μετά από θεραπεία για λέμφωμα Hodgkin το 1980.

Τα κύτταρα HEL είναι ικανά για αυθόρμητη και επαγόμενη σύνθεση σφαιρίνης, παράγοντας κυρίως G γάμμα και Α γάμμα αλυσίδες. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν επίσης εμβρυϊκές αλυσίδες (έψιλον, ζήτα) και άλφα αλυσίδες σε ελάχιστες ποσότητες, ενώ οι βήτα αλυσίδες είναι μη ανιχνεύσιμες.

Τα κύτταρα HEL είναι στρογγυλά, μεγάλα έως περιστασιακά γιγαντιαία πολυπύρηνα, μεμονωμένα κύτταρα σε εναιώρημα, με λίγα κύτταρα προσκολλημένα. Η έκφραση της μεταλλαγμένης JAK2 έχει επιβεβαιωθεί σε αυτά τα κύτταρα με RT-PCR και αλληλούχιση. Τα κύτταρα HEL εκφράζουν διάφορους δείκτες κυτταρικής επιφάνειας, συμπεριλαμβανομένων των CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ και CD235a+. Σύμφωνα με την έρευνα, η υδροξυουρία, ένα φάρμακο που χρησιμοποιείται συνήθως για τη θεραπεία μιας ποικιλίας καρκίνων, συμπεριλαμβανομένης της ερυθρολευχαιμίας, μπορεί επίσης να ρυθμίζει το θάνατο των κυττάρων HEL.

Η απόπτωση των κυττάρων HEL που παράγεται από την υδροξυουρία μπορεί να συνδέεται με την τελική διαφοροποίηση των κυττάρων HEL. Επιπλέον, προηγούμενες έρευνες έχουν δείξει ότι η υδροξυουρία μπορεί να είναι ζωτικής σημασίας για τον έλεγχο του πολλαπλασιασμού και της διαφοροποίησης των κυττάρων HEL.

Ιστός
Περιφερικό αίμα
Ασθένεια
Ερυθρολευχαιμία
Συνώνυμα
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Αναστολή
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Στρογγυλεμένο
Χρόνος διπλασιασμού
36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HEL (αριθμός καταλόγου Cytion 305022)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0001

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Συγκεντρώστε τα εναιωρήματα σε ένα σωληνάριο των 15 ml και πλύνετε απαλά τα προσκολλημένα κύτταρα με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (χρησιμοποιήστε 3-5 ml για φιάλες T25 και 5-10 ml για φιάλες T75). Εφαρμόστε Accutase (1-2 ml για φιάλες T25, 2,5 ml για φιάλες T75) εξασφαλίζοντας πλήρη κάλυψη της κυτταρικής στιβάδας. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 10 λεπτά. Μετά την επώαση, συνδυάστε και φυγοκεντρίστε τόσο το εναιώρημα όσο και τα προσκολλημένα κύτταρα. Μετά τη φυγοκέντρηση, ανασυγκεντρώστε προσεκτικά το κυτταρικό σφαιρίδιο και μεταφέρετε το εναιώρημα κυττάρων σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
30 χρόνια
Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό