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HEL
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Erythroleukämie
Synonyme
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

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HEL

Cell line · Artikelnummer 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

HEL-Zellen sind eine menschliche Erythroleukämie-Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines 30-jährigen Mannes mit Erythroleukämie im Rückfall nach einer Behandlung des Hodgkin-Lymphoms im Jahr 1980 gewonnen wurde.

HEL-Zellen sind zur spontanen und induzierten Globinsynthese fähig und produzieren hauptsächlich die G gamma- und A gamma-Ketten. Diese Zellen exprimieren auch embryonale Ketten (Epsilon, Zeta) und Alpha-Ketten in minimalen Mengen, während Beta-Ketten nicht nachweisbar sind.

HEL-Zellen sind runde, große bis gelegentlich riesige polynukleierte Einzelzellen in Suspension, wobei einige wenige Zellen adhärent sind. Die Expression von mutiertem JAK2 wurde in diesen Zellen durch RT-PCR und Sequenzierung bestätigt. HEL-Zellen exprimieren mehrere Zelloberflächenmarker, darunter CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ und CD235a+. Forschungsergebnissen zufolge kann Hydroxyharnstoff, ein Medikament, das routinemäßig zur Behandlung einer Reihe von Krebsarten, einschließlich Erythroleukämie, eingesetzt wird, auch den Tod von HEL-Zellen regulieren.

Die durch Hydroxyharnstoff ausgelöste Apoptose der HEL-Zellen könnte mit der terminalen Differenzierung der HEL-Zellen zusammenhängen. Darüber hinaus haben frühere Forschungsarbeiten gezeigt, dass Hydroxyharnstoff bei der Kontrolle der Proliferation und Differenzierung von HEL-Zellen eine entscheidende Rolle spielen kann.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Erythroleukämie
Synonyme
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Abgerundet
Verdopplungszeit
36 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
HEL (Cytion Katalognummer 305022)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
30 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch