Prejsť na obsah
HEL
Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Erytolukémia
Synonymá
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumenty

HEL

Cell line · Číslo výrobku 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky HEL sú ľudskou erytroleukemickou bunkovou líniou, ktorá bola vytvorená z periférnej krvi 30-ročného muža s erytroleukémiou v relapse po liečbe Hodgkinovho lymfómu v roku 1980.

Bunky HEL sú schopné spontánnej a indukovanej syntézy globínu, pričom produkujú najmä reťazce G gama a A gama. Tieto bunky tiež exprimujú embryonálne reťazce (epsilon, zeta) a alfa reťazce v minimálnom množstve, zatiaľ čo beta reťazce sú nedetekovateľné.

Bunky HEL sú okrúhle, veľké až občas obrovské mnohojadrové, jednotlivé bunky v suspenzii, s niekoľkými priliehajúcimi bunkami. Expresia mutovaného JAK2 sa v týchto bunkách potvrdila pomocou RT-PCR a sekvenovania. Bunky HEL exprimujú niekoľko povrchových bunkových markerov vrátane CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ a CD235a+. Podľa výskumu môže hydroxyurea, liek bežne používaný na liečbu rôznych druhov rakoviny vrátane erytroleukémie, tiež regulovať smrť buniek HEL.

Apoptóza buniek HEL vyvolaná hydroxyureou môže súvisieť s terminálnou diferenciáciou buniek HEL. Okrem toho predchádzajúci výskum ukázal, že hydroxyurea môže byť kľúčová pri kontrole proliferácie a diferenciácie buniek HEL.

Tkanivo
Periférna krv
Choroba
Erytolukémia
Synonymá
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Zaoblené
Doba zdvojnásobenia
36 hodín

04Identifikátory

Citácia
HEL (katalógové číslo Cytion 305022)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
30 rokov
Etnická príslušnosť
Európska