Přejít na obsah
HEL
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Erytroleukémie
Synonyma
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumenty

HEL

Cell line · Číslo výrobku 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky HEL jsou lidská erytroleukemická buněčná linie, která byla vytvořena z periferní krve 30letého muže s erytroleukemií v relapsu po léčbě Hodgkinova lymfomu v roce 1980.

Buňky HEL jsou schopny spontánní i indukované syntézy globinu a produkují především řetězce G gama a A gama. Tyto buňky také exprimují embryonální řetězce (epsilon, zeta) a alfa řetězce v minimálním množství, zatímco beta řetězce jsou nedetekovatelné.

HEL buňky jsou kulaté, velké až občas obrovské polynukleární, jednotlivé buňky v suspenzi, s několika málo buňkami adherentními. Exprese mutovaného JAK2 byla v těchto buňkách potvrzena pomocí RT-PCR a sekvenování. Buňky HEL exprimují několik povrchových buněčných markerů, včetně CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ a CD235a+. Podle výzkumu může hydroxyurea, lék běžně používaný k léčbě různých druhů rakoviny, včetně erytroleukémie, rovněž regulovat smrt buněk HEL.

Apoptóza buněk HEL vyvolaná hydroxyureou může souviset s terminální diferenciací buněk HEL. Kromě toho dřívější výzkum ukázal, že hydroxyurea může mít zásadní význam pro řízení proliferace a diferenciace buněk HEL.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Erytroleukémie
Synonyma
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Zaoblené
Doba zdvojnásobení
36 hodin

04Identifikátory

Citace
HEL (katalogové číslo Cytion 305022)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
30 let
Etnická příslušnost
Evropská