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HEL
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Eritroleucemia
Sinonimi
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Documenti

HEL

Cell line · Codice prodotto 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule HEL sono una linea cellulare eritroleucemica umana creata a partire dal sangue periferico di un uomo di 30 anni affetto da eritroleucemia in recidiva dopo un trattamento per linfoma di Hodgkin nel 1980.

Le cellule HEL sono capaci di sintesi globinica spontanea e indotta, producendo principalmente catene G gamma e A gamma. Queste cellule esprimono anche catene embrionali (epsilon, zeta) e catene alfa in quantità minime, mentre le catene beta non sono rilevabili.

Le cellule HEL sono rotonde, da grandi a occasionalmente giganti, polinucleate, singole cellule in sospensione, con poche cellule aderenti. L'espressione di JAK2 mutata è stata confermata in queste cellule mediante RT-PCR e sequenziamento. Le cellule HEL esprimono diversi marcatori di superficie cellulare, tra cui CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ e CD235a+. Secondo la ricerca, l'idrossiurea, un farmaco utilizzato di routine per trattare una serie di tumori, tra cui l'eritroleucemia, può anche regolare la morte delle cellule HEL.

L'apoptosi delle cellule HEL prodotta dall'idrossiurea potrebbe essere collegata alla differenziazione terminale delle cellule HEL. Inoltre, ricerche precedenti hanno dimostrato che l'idrossiurea può essere cruciale nel controllo della proliferazione e della differenziazione delle cellule HEL.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Eritroleucemia
Sinonimi
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Arrotondato
Tempo di raddoppio
36 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HEL (numero di catalogo Cytion 305022)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
30 anni
Etnia
Europeo