Gå til innholdet
HEL
Vev
Perifert blod
Sykdom
Erytroleukemi
Synonymer
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumenter

HEL

Cell line · Produktnummer 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HEL-celler er en human erytroleukemicellelinje som ble etablert fra perifert blod fra en 30 år gammel mann med erytroleukemi i tilbakefall etter behandling for Hodgkin-lymfom i 1980.

HEL-celler er i stand til spontan og indusert globinsyntese, og produserer hovedsakelig G gamma- og A gamma-kjeder. Disse cellene uttrykker også embryonale kjeder (epsilon, zeta) og alfa-kjeder i minimale mengder, mens beta-kjeder ikke kan påvises.

HEL-cellene er runde, store til av og til kjempestore polynukleære enkeltceller i suspensjon, med noen få celler som fester seg. Uttrykket av mutert JAK2 er bekreftet i disse cellene ved hjelp av RT-PCR og sekvensering. HEL-celler uttrykker flere celleoverflatemarkører, blant annet CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ og CD235a+. Ifølge forskningen kan hydroksyurea, et legemiddel som rutinemessig brukes til behandling av en rekke kreftformer, inkludert erytroleukemi, også regulere HEL-cellenes død.

HEL-cellenes apoptose som følge av hydroksyurea, kan ha sammenheng med HEL-cellenes terminale differensiering. I tillegg har tidligere forskning vist at hydroksyurea kan være avgjørende for å kontrollere HEL-cellenes spredning og differensiering.

Vev
Perifert blod
Sykdom
Erytroleukemi
Synonymer
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Avrundet
Fordoblingstid
36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HEL (Cytion-katalognummer 305022)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Samle suspensjonscellene i et 15 ml rør, og vask de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (bruk 3-5 ml for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml for T25-kolber, 2,5 ml for T75-kolber) og sørg for full dekning av cellelaget. La cellene inkubere i romtemperatur i 10 minutter. Etter inkubasjon kombineres og sentrifugeres både suspensjonen og de adherente cellene. Etter sentrifugering resuspenderes cellepelleten forsiktig, og cellesuspensjonen overføres til nye kolber som inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
30 år
Etnisitet
Europeisk