Preskoči na vsebino
HEL
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Eritroleukemija
Sinonimi
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumenti

HEL

Cell line · Številka izdelka 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice HEL so celična linija človeške eritrolevkemije, ki je bila leta 1980 pridobljena iz periferne krvi 30-letnega moškega z eritrolevkemijo v ponovitvi po zdravljenju Hodgkinovega limfoma.

HEL celice so sposobne spontane in inducirane sinteze globina in proizvajajo predvsem verige G gama in A gama. Te celice izražajo tudi embrionalne verige (epsilon, zeta) in verige alfa v minimalnih količinah, medtem ko verig beta ni mogoče odkriti.

Celice HEL so okrogle, velike do občasno orjaške polinuklearne, posamezne celice v suspenziji, z nekaj prilepljenimi celicami. V teh celicah je bilo z RT-PCR in sekvenciranjem potrjeno izražanje mutiranega JAK2. Celice HEL izražajo več površinskih celičnih označevalcev, vključno s CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ in CD235a+. Glede na raziskave lahko hidroksiurea, zdravilo, ki se rutinsko uporablja za zdravljenje različnih vrst raka, vključno z eritroleukemijo, uravnava tudi smrt celic HEL.

Apoptoza celic HEL, ki jo povzroča hidroksiurea, je lahko povezana s končno diferenciacijo celic HEL. Poleg tega so prejšnje raziskave pokazale, da je lahko hidroksiurea ključna pri nadzoru proliferacije in diferenciacije celic HEL.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Eritroleukemija
Sinonimi
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Zaokroženo
Čas podvojitve
36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HEL (kataloška številka Cytion 305022)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
30 let
Etnična pripadnost
Evropski