Pāriet uz saturu
HEL
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Eritoleikēmija
Sinonīmi
Hel, GM06141, GM06141B, Human ErythroLeukemia

Dokumenti

HEL

Cell line · Preces numurs 305022

HEL cells are a human erythroleukemia cell line that was established from the peripheral blood of a 30-year-old man with erythroleukemia in relapse after ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HEL šūnas ir cilvēka eritoleikēmijas šūnu līnija, kas tika izveidota no 30 gadus veca vīrieša ar eritoleikēmiju perifērajām asinīm pēc Hodžkina limfomas ārstēšanas recidīva 1980. gadā.

HEL šūnas spēj spontāni un inducēti sintezēt globīnus, ražojot galvenokārt G gamma un A gamma ķēdes. Šīs šūnas minimālā daudzumā ekspresē arī embrionālās ķēdes (epsilon, zeta) un alfa ķēdes, bet beta ķēdes nav nosakāmas.

HEL šūnas ir apaļas, lielas līdz dažkārt milzu polinukleāras, atsevišķas šūnas suspensijā, ar dažām pielipušām šūnām. Šajās šūnās ar RT-PCR un sekvenēšanu ir apstiprināta mutētā JAK2 ekspresija. HEL šūnas ekspresē vairākus šūnu virsmas marķierus, tostarp CD3-, CD13+, CD14-, CD19-, CD33+, CD41a+, CD71+ un CD235a+. Saskaņā ar pētījumiem hidroksiurēze, zāles, ko parasti lieto dažādu vēža veidu, tostarp eritroleikēmijas, ārstēšanai, var regulēt arī HEL šūnu nāvi.

Hidroksiurīnvielas izraisītā HEL šūnu apoptoze var būt saistīta ar HEL šūnu terminālo diferenciāciju. Turklāt agrāk veiktie pētījumi liecina, ka hidroksiurīnvielai var būt izšķiroša nozīme HEL šūnu proliferācijas un diferenciācijas kontrolē.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Eritoleikēmija
Sinonīmi
  • Hel
  • GM06141
  • GM06141B
  • Human ErythroLeukemia

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Noapaļots
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HEL (Cytion kataloga numurs 305022)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0001

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
30 gadi
Etniskā piederība
Eiropas