Langsung ke isi
HEK293-GPRC5D
Tisu
Ginjal Janin
Penyakit
Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)

HEK293-GPRC5D

Cell line · Nomor produk 305989

Penafian: Harga yang ditampilkan untuk lini sel hanya berlaku bagi pelanggan dari kalangan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya...

€1,900.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi

Pernyataan Penolakan: Harga yang ditampilkan untuk garis sel ini khusus berlaku bagi pelanggan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya sekitar €6.250.
Jika Anda mewakili entitas komersial atau tidak yakin kategori mana yang berlaku, silakan hubungi kami.


Sel HEK293-GPRC5D adalah sel ginjal embrio manusia 293 (HEK293) yang direkayasa untuk secara stabil mengekspresikan reseptor terikat protein G manusia dari kelompok C anggota 5 (GPRC5D), sebuah reseptor yatim piatu yang termasuk dalam keluarga reseptor terikat protein G kelas C. GPRC5D menunjukkan ekspresi yang sangat terbatas pada jaringan normal, dengan ekspresi dominan dilaporkan pada folikel rambut, jaringan keratinisasi, dan sel plasma. Yang penting, reseptor ini diekspresikan secara tinggi pada multiple myeloma dan beberapa neoplasma sel plasma lainnya, di mana distribusi jaringan normalnya yang terbatas dan ekspresi yang kuat terkait tumor telah menjadikannya target utama untuk pengembangan imunoterapi, terutama pada pasien yang mengalami kekambuhan setelah terapi yang ditargetkan terhadap BCMA.

Sel HEK293-GPRC5D secara luas digunakan dalam penelitian onkologi hematologi dan pengembangan terapi untuk karakterisasi antibodi monoklonal yang menargetkan GPRC5D, pengikat sel T bispesifik, konjugat antibodi-obat, serta terapi sel CAR-T atau CAR-NK. Sistem ekspresi rekombinan yang stabil memungkinkan evaluasi kuantitatif terhadap afinitas ikatan antigen, okupansi reseptor, kepadatan ekspresi permukaan, spesifisitas epitop, dan sitotoksisitas yang bergantung pada target. Sel-sel ini sangat berharga untuk menilai aktivitas dan selektivitas terapi sel imun yang dimodifikasi serta biologik pengarah sel T yang menargetkan neoplasma positif GPRC5D. Aplikasi tambahan meliputi pengembangan uji sitometri aliran, uji pelapor, skrining berkapasitas tinggi, serta validasi agen pencitraan atau reagen diagnostik yang spesifik terhadap reseptor.

Tisu
Ginjal Janin
Penyakit
Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
Aplikasi
Pengembangan antibodi yang menargetkan GPRC5D dan antibodi bispesifik; terapi untuk mieloma multipel; terapi sel CAR-T; uji ADCC/CDC; sitometri aliran; skrining imuno-onkologi

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel
Waktu penggandaan
sekitar 24–36 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HEK293-GPRC5D (Nomor katalog Cytion 305989)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6G25

05Ekspresi dan kerentanan

Reseptor yang diekspresikan
GPRC5D

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS, 1 mM natrium piruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tambahkan Geneticin (G418-Sulfat) untuk mencapai konsentrasi akhir 1 mg / mL.
Reagen disosiasi
Tripsin-EDTA
Perbanyakan sel
Untuk kultur sel yang melekat secara rutin: Aspirasi media kultur lama dari sel yang melekat, dan cuci dengan PBS untuk menghilangkan media yang tersisa. Setelah menyedot PBS, tambahkan volume larutan Trypsin/EDTA yang sesuai berdasarkan ukuran bejana kultur (misalnya, 1 ml untuk labu T25, 3 ml untuk labu T75) dan inkubasi pada suhu kamar atau 37 ° C hingga sel terlepas (5-10 menit). Pantau pelepasan di bawah mikroskop, dan ketuk bejana dengan lembut jika perlu untuk melepaskan sel. Setelah terlepas, tambahkan media lengkap untuk menonaktifkan Trypsin/EDTA, resuspensi sel dengan hati-hati, dan pindahkan alikuot suspensi sel ke dalam bejana kultur baru yang berisi media segar. Tempatkan bejana dalam inkubator yang diatur pada suhu 37°C dengan 5%CO2, dan ganti medium setiap 2-3 hari.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
2 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan

Setelah dicairkan, pisahkan sel dengan rasio 1:2 hingga 1:3 dalam labu T25 dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan dan melekat (untuk kultur yang melekat) setidaknya selama 24 jam.

Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Janin