HEK293-GPRC5D

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Le cellule HEK293-GPRC5D sono cellule renali embrionali umane 293 (HEK293) ingegnerizzate per esprimere in modo stabile il recettore umano della famiglia C, gruppo 5, membro D (GPRC5D), un recettore orfano appartenente alla famiglia dei recettori accoppiati alle proteine G di classe C. Il GPRC5D mostra un'espressione altamente limitata nei tessuti normali, con espressione predominante segnalata nei follicoli piliferi, nei tessuti cheratinizzati e nelle plasmacellule. È importante sottolineare che il recettore è altamente espresso nel mieloma multiplo e in alcune altre neoplasie a plasmacellule, dove la sua distribuzione limitata nei tessuti normali e la forte espressione associata al tumore lo hanno reso un bersaglio di rilievo per lo sviluppo di terapie immunologiche, in particolare nei pazienti con recidiva dopo terapie dirette contro il BCMA.

Le cellule HEK293-GPRC5D sono ampiamente utilizzate nella ricerca oncologica ematologica e nello sviluppo terapeutico per la caratterizzazione di anticorpi monoclonali mirati a GPRC5D, attivatori bispecifici delle cellule T, coniugati anticorpo-farmaco e terapie con cellule CAR-T o CAR-NK. Il sistema di espressione ricombinante stabile consente la valutazione quantitativa dell'affinità di legame dell'antigene, dell'occupazione del recettore, della densità di espressione di superficie, della specificità dell'epitopo e della citotossicità dipendente dal bersaglio. Queste cellule sono particolarmente preziose per valutare l'attività e la selettività delle terapie con cellule immunitarie ingegnerizzate e dei prodotti biologici di reindirizzamento delle cellule T che prendono di mira neoplasie GPRC5D-positive. Ulteriori applicazioni includono lo sviluppo di test di citometria a flusso, test reporter, screening ad alta produttività e la validazione di agenti di imaging specifici per recettori o reagenti diagnostici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano (per le colture aderenti) per almeno 24 ore.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia