Премини към съдържанието
HEK293-GPRC5D
Тъкан
Фетален бъбрек
Заболяване
Трансформиран/увековечен; нетуморогенен (на базата на HEK293)

Документи

HEK293-GPRC5D

Cell line · Номер на продукта 305989

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цените...

€1,900.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цената е приблизително 6 250 евро.
Ако представлявате търговски субект или не сте сигурни в коя категория попадате, моля свържете се с нас.


Клетките HEK293-GPRC5D са човешки ембрионални бъбречни клетки 293 (HEK293), модифицирани да експресират стабилно човешкия G-протеин-свързан рецептор от семейство C, група 5, член D (GPRC5D) – орфанен рецептор, принадлежащ към семейството на G-протеин-свързаните рецептори от клас C. GPRC5D проявява силно ограничена експресия в нормалните тъкани, като преобладаваща експресия се наблюдава в космените фоликули, кератинизираните тъкани и плазмените клетки. Важно е да се отбележи, че рецепторът се експресира в голяма степен при множествена миелома и някои други злокачествени заболявания на плазмените клетки, където ограниченото му разпространение в нормалните тъкани и силната му експресия, свързана с тумора, го превръщат в значима мишена за разработване на имунотерапии, особено при пациенти с рецидив след терапии, насочени към BCMA.

Клетките HEK293-GPRC5D се използват широко в изследванията в областта на хематологичната онкология и разработването на терапии за характеризиране на моноклонални антитела, насочени към GPRC5D, биспецифични Т-клетъчни ангажиращи агенти, конюгати на антитела и лекарства, както и CAR-T или CAR-NK клетъчни терапии. Стабилната рекомбинантна експресионна система позволява количествена оценка на афинитета на свързване с антигена, заетостта на рецептора, плътността на повърхностната експресия, специфичността на епитопа и зависимата от мишената цитотоксичност. Тези клетки са особено ценни за оценка на активността и селективността на инженерни имунни клетъчни терапии и биологични продукти за пренасочване на Т-клетки, насочени към GPRC5D-позитивни злокачествени заболявания. Допълнителните приложения включват разработване на тестове за проточна цитометрия, репортерни тестове, скрининг с висока производителност и валидиране на рецептор-специфични агенти за визуализация или диагностични реагенти.

Тъкан
Фетален бъбрек
Заболяване
Трансформиран/увековечен; нетуморогенен (на базата на HEK293)
Приложения
Разработване на антитела, насочени срещу GPRC5D, и биспецифични антитела; терапевтични средства за лечение на множествена миелома; CAR-T-клетъчна терапия; ADCC/CDC-тестове; проточна цитометрия; имуноонкологичен скрининг

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Време за удвояване
около 24–36 часа

04Идентификатори

Източник
HEK293-GPRC5D (каталожен номер на Cytion 305989)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_6G25

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
GPRC5D

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 1 mM натриев пируват, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 1 mg/ml.
Реагент за дисоциация
Трипсин-EDTA
Пресаждане
За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C, докато клетките се отделят (5-10 минути). Наблюдавайте отделянето под микроскоп и при необходимост леко потупайте съда, за да освободите клетките. След като се отделят, добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
2 до 4 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване

След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да залепнат (за залепнали култури) за най-малко 24 часа.

Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Плод

Може да ви е необходимо също