HEK293-GPRC5D

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Las células HEK293-GPRC5D son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de forma estable el receptor humano de la familia de receptores acoplados a proteínas G, grupo C, miembro 5, miembro D (GPRC5D), un receptor huérfano perteneciente a la familia de receptores acoplados a proteínas G de clase C. El GPRC5D presenta una expresión muy restringida en los tejidos normales, con una expresión predominante en los folículos pilosos, los tejidos queratinizados y las células plasmáticas. Es importante destacar que el receptor se expresa en gran medida en el mieloma múltiple y en otras neoplasias de células plasmáticas, donde su limitada distribución en tejidos normales y su sólida expresión asociada a tumores lo han convertido en un objetivo destacado para el desarrollo de inmunoterapias, especialmente en pacientes que recaen tras terapias dirigidas contra el BCMA.

Las células HEK293-GPRC5D se utilizan ampliamente en la investigación oncológica hematológica y el desarrollo terapéutico para la caracterización de anticuerpos monoclonales dirigidos contra GPRC5D, activadores bispecíficos de células T, conjugados de anticuerpos y fármacos, y terapias con células CAR-T o CAR-NK. El sistema de expresión recombinante estable permite la evaluación cuantitativa de la afinidad de unión al antígeno, la ocupación del receptor, la densidad de expresión en superficie, la especificidad del epítopo y la citotoxicidad dependiente del objetivo. Estas células son especialmente valiosas para evaluar la actividad y la selectividad de las terapias con células inmunitarias modificadas y de los productos biológicos de redireccionamiento de células T dirigidos a neoplasias GPRC5D-positivas. Otras aplicaciones incluyen el desarrollo de ensayos de citometría de flujo, ensayos con marcadores, cribado de alto rendimiento y la validación de agentes de imagen específicos para receptores o reactivos de diagnóstico.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía