
- Kude
- Loote neerud
- Haigus
- Muundatud/immortaliseeritud; ei põhjusta kasvajate teket (HEK293-taust)
Dokumendid
HEK293-GPRC5D
Cell line · Toote number 305989
Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hinnad...
Kohandamine / Soovitused
- HEK293-GPRC5DCell line€1,900.00
01Üldine teave
- Kirjeldus
Vastutuse välistamine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind umbes 6250 eurot.
Kui esindate äriühingut või ei ole kindel, milline kategooria teie puhul kehtib, palun võtke meiega ühendust.
HEK293-GPRC5D rakud on inimese embrüonaalsed neeru 293 (HEK293) rakud, mis on geneetiliselt muundatud stabiilselt ekspresseerima inimese G-valgu-seotud retseptorite perekonna C rühma 5 liiget D (GPRC5D), mis on C-klassi G-valgu-seotud retseptorite perekonda kuuluv orvuretseptor. GPRC5D ekspresseerub normaalse kudedes väga piiratult, kusjuures domineeriv ekspressioon on täheldatud karvafolliikulites, keratiniseerunud kudedes ja plasmarakkudes. Oluline on, et retseptor ekspresseerub tugevalt mitmekordse müeloomi ja teatud teiste plasmarakkude pahaloomuliste kasvajate korral, kus selle piiratud jaotus normaalse kudedes ja tugev kasvajaga seotud ekspressioon on muutnud selle silmapaistvaks sihtmärgiks immunoteraapia arendamisel, eriti patsientidel, kellel on esinenud retsidiiv pärast BCMA-suunatud ravimeetodeid.
HEK293-GPRC5D rakke kasutatakse laialdaselt hematoloogilise onkoloogia uurimistöös ja ravimite arendamisel GPRC5D-le suunatud monoklonaalsete antikehade, bispetsiifiliste T-rakkude aktivaatorite, antikeha-ravimkonjugaatide ning CAR-T- või CAR-NK-rakkude ravi iseloomustamiseks. Stabiilne rekombinantne ekspressioonisüsteem võimaldab kvantitatiivselt hinnata antigeeni seondumisaafiinsust, retseptori hõivatust, pinnalise ekspressiooni tihedust, epitoobi spetsiifilisust ja sihtmärgist sõltuvat tsütotoksilisust. Need rakud on eriti väärtuslikud GPRC5D-positiivsetele pahaloomulistele kasvajatele suunatud geneetiliselt muundatud immuunrakkude ravimite ja T-rakkude suunamisel põhinevate bioloogiliste ravimite aktiivsuse ja selektiivsuse hindamisel. Lisarakendused hõlmavad voolutsütomeetria analüüside arendamist, reporteranalüüse, suure läbilaskevõimega sõelumist ning retseptorispetsiifiliste pildistamisainete või diagnostiliste reagentide valideerimist.
- Kude
- Loote neerud
- Haigus
- Muundatud/immortaliseeritud; ei põhjusta kasvajate teket (HEK293-taust)
- Rakendused
- GPRC5D-le suunatud antikeha ja bispetsiifilise antikeha arendamine; hulgimüeloomi ravimid; CAR-T-rakkude ravi; ADCC/CDC-analüüsid; voolutsütomeetria; immunoonkoloogiline sõelumine
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteelirakud
- Kahekordistumisaeg
- u. 24–36 tundi
04Tunnused
- Viide
- HEK293-GPRC5D (Cytioni katalooginumber 305989)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G25
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Ekspresseeritud retseptorid
- GPRC5D
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendage keskkonda 10% FBS-iga, 1 mM naatriumpüruvaadiga, 10 mM HEPES-iga, 1% NEAA-ga. Lisage geneetilistiini (G418-Sulfat), et saavutada lõplik kontsentratsioon 1 mg/ml.
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Trypsin-EDTA
- Kultuuri edasikasvatamine
- Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37 °C, kuni rakud eralduvad (5-10 minutit). Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kasvatusanumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
- Jagamissuhe
- 1–5
- Külvitihedus
- 2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmumisprotsessist ja adhereeruda (adhereeruvate kultuuride puhul) vähemalt 24 tundi.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- Loote
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Vastutuse välistamine
- Meie rakud on ette nähtud üksnes in vitro laboratoorseks uurimistööks ning need ei ole mõeldud kliiniliseks või diagnostiliseks kasutamiseks, samuti ei tohi neid manustada inimestele ega kasutada veterinaarsetel eesmärkidel. Kasutajad peavad järgima kõiki kohaldatavaid suuniseid ja eeskirju nende rakkude käitlemise ja kasutamise kohta teadusuuringutes.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Kehtivad kolmandate osapooltega sõlmitud lepingud
- Jah


.jpg)