
- Kudos
- Sikiön munuaiset
- Sairaus
- Muunnettu/ikuisesti elävä; ei aiheuta kasvaimia (HEK293-tausta)
Asiakirjat
HEK293-GPRC5D
Cell line · Tuotenumero 305989
Vastuuvapauslauseke: Solulinjojen kohdalla ilmoitetut hinnat koskevat yksinomaan akateemisia ja voittoa tavoittelemattomia asiakkaita. Kaupallisten toimijoiden osalta hinnat...
Räätälöinti / Suositukset
- HEK293-GPRC5DCell line€1,900.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
Vastuuvapauslauseke: Solulinjojen hinnat koskevat yksinomaan akateemisia ja voittoa tavoittelemattomia asiakkaita. Kaupallisille toimijoille hinta on noin 6 250 euroa.
Jos edustat kaupallista toimijaa tai et ole varma, kumpaanko ryhmään kuulut, ota meihin yhteyttä.
HEK293-GPRC5D-solut ovat ihmisen alkion munuaisperäisiä 293 (HEK293) -soluja, jotka on muokattu ilmentämään stabiilisti ihmisen G-proteiiniin kytkeytyvän reseptorin perheen C-ryhmän 5. jäsentä D (GPRC5D), joka on C-luokan G-proteiiniin kytkeytyvään reseptoriperheeseen kuuluva orpo reseptori. GPRC5D:n ilmentyminen on hyvin rajoittunutta normaaleissa kudoksissa, ja sen ilmentymistä on raportoitu pääasiassa karvatuppeissa, keratinoituneissa kudoksissa ja plasmasoluissa. Tärkeää on, että reseptoria ilmentyy runsaasti multippelissa myeloomassa ja tietyissä muissa plasmasolujen pahanlaatuisissa kasvaimissa, joissa sen rajoitettu jakautuminen normaaleissa kudoksissa ja voimakas tuumoriin liittyvä ilmentyminen ovat tehneet siitä merkittävän kohteen immunoterapian kehittämiselle, erityisesti potilailla, joilla on uusiutunut BCMA-kohdennettujen hoitojen jälkeen.
HEK293-GPRC5D-soluja käytetään laajalti hematologisen onkologian tutkimuksessa ja terapeuttisessa kehityksessä GPRC5D:tä kohdentavien monoklonaalisten vasta-aineiden, bispesifisten T-solujen aktivaattoreiden, vasta-aine-lääke-konjugaattien sekä CAR-T- tai CAR-NK-soluterapioiden karakterisoimiseksi. Vakaa rekombinanttinen ilmentymisjärjestelmä mahdollistaa antigeenisidonta-affiniteetin, reseptorin käyttöasteen, pinta-ilmentymistiheyden, epitooppispesifisyyden ja kohde-riippuvaisen sytotoksisuuden kvantitatiivisen arvioinnin. Nämä solut ovat erityisen arvokkaita GPRC5D-positiivisiin pahanlaatuisiin kasvaimiin kohdistuvien muunneltujen immuunisoluterapioiden ja T-soluja uudelleenohjaavien biologisten lääkkeiden aktiivisuuden ja selektiivisyyden arvioinnissa. Muita sovelluksia ovat virtaussytometrianalyysien kehittäminen, raportointianalyysit, suurikapasiteettinen seulonta sekä reseptorispesifisten kuvantamisaineiden tai diagnostisten reagenssien validointi.
- Kudos
- Sikiön munuaiset
- Sairaus
- Muunnettu/ikuisesti elävä; ei aiheuta kasvaimia (HEK293-tausta)
- Sovellukset
- GPRC5D-vasta-aineen ja bispesifisen vasta-aineen kehittäminen; multippelin myelooman hoidot; CAR-T-soluterapia; ADCC/CDC-määritykset; virtaussytometria; immuno-onkologinen seulonta
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-S1
- GMO-statuksen tiedot
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Epiteelisolut
- Kaksinkertaistumisaika
- noin 24–36 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HEK293-GPRC5D (Cytion-tuotenumero 305989)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G25
05Ilmentyminen ja alttius
- Ilmentyvät reseptorit
- GPRC5D
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennä elatusainetta 10 % FBS:llä, 1 mM natriumpyruvaatilla, 10 mM HEPES:llä, 1 % NEAA:lla. Lisää genetiinejä (G418-Sulfat), jotta lopullinen pitoisuus on 1 mg/ml.
- Dissosiaatioreagenssi
- Trypsin-EDTA
- Soluviljely
- Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa, kunnes solut irtoavat (5-10 minuuttia). Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
- Jakosuhde
- 1–5
- Kylvötiheys
- 2–4 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen solut jaetaan T25-pulloihin suhteessa 1:2 tai 1:3 ja annetaan solujen toipua pakastuksesta ja adheesiota (adheesioviljelmien osalta) vähintään 24 tuntia.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- Sikiö
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Vastuuvapauslauseke
- Solujamme tarjotaan yksinomaan in vitro -laboratoriotutkimustarkoituksiin, eikä niitä ole tarkoitettu kliiniseen tai diagnostiseen käyttöön, eikä niitä saa antaa ihmisille tai käyttää eläinlääkinnällisiin tarkoituksiin. Käyttäjien on noudatettava kaikkia sovellettavia ohjeita ja määräyksiä, jotka koskevat näiden solujen käsittelyä ja käyttöä tutkimusympäristössä.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Sovelletaan kolmansien osapuolten kanssa tehtyjä sopimuksia
- Kyllä


.jpg)