Перейти до вмісту
HEK293-GPRC5D
Тканина
Ембріональна нирка
Хвороба
Трансформовані/увічнені; непухлиногенні (на основі клітинної лінії HEK293)

Документи

HEK293-GPRC5D

Cell line · Номер товару 305989

Застереження: Ціни, вказані для клітинних ліній, призначені виключно для клієнтів з академічного сектору та некомерційних організацій. Для комерційних організацій ціни...

€1,900.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

Застереження: Вказані ціни на клітинні лінії діють виключно для клієнтів з академічних та некомерційних установ. Для комерційних організацій ціна становить приблизно 6 250 євро.
Якщо ви представляєте комерційну організацію або не впевнені, до якої категорії належите, будь ласка, зверніться до нас.


Клітини HEK293-GPRC5D — це клітини людської ембріональної нирки 293 (HEK293), модифіковані для стабільної експресії людського рецептора, пов'язаного з G-білком, групи C, члену 5, типу D (GPRC5D) — орфанного рецептора, що належить до класу C сімейства рецепторів, пов'язаних з G-білком. GPRC5D демонструє дуже обмежену експресію в нормальних тканинах, причому переважна експресія спостерігається у волосяних фолікулах, кератинізованих тканинах та плазматичних клітинах. Важливо, що цей рецептор високо експресується при множинній мієломі та деяких інших злоякісних новоутвореннях з плазматичних клітин, де його обмежена дистрибуція в нормальних тканинах та сильна експресія, пов’язана з пухлиною, зробили його важливою мішенню для розробки імунотерапії, особливо у пацієнтів із рецидивом після терапії, спрямованої на BCMA.

Клітини HEK293-GPRC5D широко використовуються в дослідженнях у галузі гематологічної онкології та розробці терапевтичних засобів для характеристики моноклональних антитіл, спрямованих на GPRC5D, біспецифічних Т-клітинних активаторів, кон’югатів антитіл з ліками, а також терапій на основі CAR-T- або CAR-NK-клітин. Стабільна рекомбінантна система експресії дозволяє проводити кількісну оцінку афінності зв'язування антигену, зайнятості рецептора, щільності поверхневої експресії, специфічності епітопу та цільової цитотоксичності. Ці клітини є особливо цінними для оцінки активності та селективності інженерних імуноклітинних терапій та біологічних препаратів, що перенаправляють Т-клітини, націлених на GPRC5D-позитивні злоякісні новоутворення. Додаткові сфери застосування включають розробку тестів для проточної цитометрії, репортерні тести, високопродуктивний скринінг та валідацію рецептор-специфічних засобів візуалізації або діагностичних реагентів.

Тканина
Ембріональна нирка
Хвороба
Трансформовані/увічнені; непухлиногенні (на основі клітинної лінії HEK293)
Застосування
Розробка антитіл, спрямованих проти GPRC5D, та біспецифічних антитіл; засоби лікування множинної мієломи; терапія CAR-T-клітинами; аналізи ADCC/CDC; проточна цитометрія; імуноонкологічний скринінг

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальні клітини
Час подвоєння
приблизно 24–36 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HEK293-GPRC5D (номер у каталозі Cytion 305989)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_6G25

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
GPRC5D

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS, 1 мМ пірувату натрію, 10 мМ HEPES, 1% NEAA. Додайте генетин (G418-Sulfat) для досягнення кінцевої концентрації 1 мг/мл.
Реагент для дисоціації
Трипсин-ЕДТА
Пересадка в нове середовище
Для рутинного культивування адгезивних клітин: Аспіруйте старе культуральне середовище з адгезивних клітин і промийте їх PBS, щоб видалити залишки середовища. Після аспірації PBS додайте відповідний об'єм розчину трипсину/ЕДТА залежно від розміру культуральної посудини (наприклад, 1 мл для колби T25, 3 мл для колби T75) та інкубуйте при кімнатній температурі або 37°C до відокремлення клітин (5-10 хвилин). Спостерігайте за відшаруванням під мікроскопом і, якщо необхідно, обережно постукайте по посудині, щоб звільнити клітини. Після відокремлення додайте повне середовище для інактивації трипсину/ЕДТА, обережно ресуспендуйте клітини і перенесіть аліквоту клітинної суспензії в нову культуральну посудину зі свіжим середовищем. Помістіть посудину в інкубатор, налаштований на 37°C з 5% CO2, і міняйте середовище кожні 2-3 дні.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 5
Щільність висіву
Від 2 до 4 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги

Після розморожування розділіть клітини у співвідношенні 1:2 - 1:3 у колбах Т25 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування і склеїтися (для адгезивних культур) протягом щонайменше 24 годин.

Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Плід

Вам також може знадобитися