
- Weefsel
- Foetale nier
- Ziekte
- Getransformeerd/vereeuwigd; niet-tumorogene (HEK293-achtergrond)
Documenten
HEK293-GPRC5D
Cell line · Productnummer 305989
Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële entiteiten gelden de pr...
Maatwerk / Aanbevelingen
- HEK293-GPRC5DCell line€1,900.00
01Algemene informatie
- Beschrijving
Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële partijen bedraagt de prijs ongeveer € 6.250.
Als u een commerciële partij vertegenwoordigt of niet zeker weet tot welke categorie u behoort, neem dan contact met ons op.
HEK293-GPRC5D-cellen zijn menselijke embryonale niercellen 293 (HEK293) die zijn gemodificeerd om op stabiele wijze menselijke G-proteïne-gekoppelde receptor familie C groep 5 lid D (GPRC5D) tot expressie te brengen, een weesreceptor die behoort tot de klasse C van de G-proteïne-gekoppelde receptorfamilie. GPRC5D vertoont een zeer beperkte expressie in normale weefsels, waarbij de expressie voornamelijk wordt waargenomen in haarzakjes, verhoornde weefsels en plasmacellen. Belangrijk is dat de receptor in hoge mate tot expressie komt bij multipel myeloom en bepaalde andere maligniteiten van plasmacellen, waar de beperkte verspreiding in normaal weefsel en de sterke tumor-geassocieerde expressie het tot een prominent doelwit hebben gemaakt voor de ontwikkeling van immuuntherapieën, met name bij patiënten die een recidief vertonen na BCMA-gerichte therapieën.
HEK293-GPRC5D-cellen worden op grote schaal gebruikt in hematologisch oncologisch onderzoek en de ontwikkeling van therapieën voor de karakterisering van GPRC5D-gerichte monoklonale antilichamen, bispecifieke T-cel-engagers, antilichaam-geneesmiddelconjugaten en CAR-T- of CAR-NK-celtherapieën. Het stabiele recombinante expressiesysteem maakt kwantitatieve evaluatie mogelijk van antigeenbindingsaffiniteit, receptorbezetting, oppervlakte-expressiedichtheid, epitopespecificiteit en doelafhankelijke cytotoxiciteit. Deze cellen zijn bijzonder waardevol voor het beoordelen van de activiteit en selectiviteit van gemanipuleerde immuunceltherapieën en T-celomleidende biologische geneesmiddelen die gericht zijn op GPRC5D-positieve maligniteiten. Aanvullende toepassingen omvatten de ontwikkeling van flowcytometrie-assays, reporterassays, high-throughput screening en validatie van receptorspecifieke beeldvormingsmiddelen of diagnostische reagentia.
- Weefsel
- Foetale nier
- Ziekte
- Getransformeerd/vereeuwigd; niet-tumorogene (HEK293-achtergrond)
- Toepassingen
- Ontwikkeling van antilichamen gericht tegen GPRC5D en bispecifieke antilichamen; geneesmiddelen voor multipel myeloom; CAR-T-celtherapie; ADCC/CDC-testen; flowcytometrie; immuno-oncologische screening
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Celtype
- Epitheelcellen
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 24-36 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- HEK293-GPRC5D (Cytion-catalogusnummer 305989)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G25
05Expressie en vatbaarheid
- Tot expressie gebrachte receptoren
- GPRC5D
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS, 1 mM natriumpyruvaat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Voeg Geneticine (G418-Sulfat) toe tot een eindconcentratie van 1 mg/mL.
- Dissociatiereagens
- Trypsine-EDTA
- Heruitplanten
- Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C totdat de cellen loskomen (5-10 minuten). Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 5
- Zaaidichtheid
- 2 tot 4 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Herstel na ontdooiing
Splits de cellen na het ontdooien in een verhouding van 1:2 tot 1:3 in T25-flesjes en laat de cellen minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces en zich hechten (voor adherente culturen).
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- Foetus
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Disclaimer
- Onze cellen worden uitsluitend geleverd voor in vitro laboratoriumonderzoek en zijn niet bedoeld voor klinisch of diagnostisch gebruik, noch mogen ze worden toegediend aan mensen of worden gebruikt voor veterinaire doeleinden. Gebruikers moeten zich houden aan alle toepasselijke richtlijnen en voorschriften voor het hanteren en gebruiken van deze cellen in een onderzoeksomgeving.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er gelden overeenkomsten met derden
- Ja


.jpg)