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HEK293-GPRC5D
Tecido
Rim fetal
Doença
Transformado/imortalizado; não tumorigénico (linha celular HEK293)

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HEK293-GPRC5D

Cell line · Número do produto 305989

Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço...

€1,900.00sem impostos nem portes de envio
Feito por encomenda
1

01Informações gerais

Descrição

Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente 6 250 €.
Se representar uma entidade comercial ou não tiver a certeza de qual a categoria a que se enquadra, por favor contacte-nos.


As células HEK293-GPRC5D são células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) modificadas para expressarem de forma estável o receptor humano da família C, grupo 5, membro D (GPRC5D), um receptor órfão pertencente à família de receptores acoplados à proteína G da classe C. O GPRC5D apresenta uma expressão altamente restrita em tecidos normais, com expressão predominante relatada nos folículos capilares, tecidos queratinizados e células plasmáticas. É importante referir que o recetor é altamente expresso no mieloma múltiplo e em certas outras neoplasias de células plasmáticas, onde a sua distribuição limitada nos tecidos normais e a expressão robusta associada ao tumor o tornaram um alvo proeminente para o desenvolvimento de imunoterapias, particularmente em doentes com recidiva após terapias direcionadas contra o BCMA.

As células HEK293-GPRC5D são amplamente utilizadas na investigação em oncologia hematológica e no desenvolvimento terapêutico para a caracterização de anticorpos monoclonais direcionados para o GPRC5D, ativadores bispecíficos de células T, conjugados anticorpo-fármaco e terapias com células CAR-T ou CAR-NK. O sistema de expressão recombinante estável permite a avaliação quantitativa da afinidade de ligação ao antígeno, ocupação do recetor, densidade de expressão na superfície, especificidade do epítopo e citotoxicidade dependente do alvo. Estas células são particularmente valiosas para avaliar a atividade e a seletividade de terapias com células imunitárias modificadas e produtos biológicos de redirecionamento de células T direcionados para neoplasias malignas GPRC5D-positivas. Aplicações adicionais incluem o desenvolvimento de ensaios de citometria de fluxo, ensaios de repórter, triagem de alto rendimento e validação de agentes de imagem específicos para recetores ou reagentes de diagnóstico.

Tecido
Rim fetal
Doença
Transformado/imortalizado; não tumorigénico (linha celular HEK293)
Aplicações
Desenvolvimento de anticorpos direcionados ao GPRC5D e de anticorpos bispecíficos; terapêuticas para o mieloma múltiplo; terapia com células CAR-T; ensaios ADCC/CDC; citometria de fluxo; rastreio imuno-oncológico

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Tempo de duplicação
aprox. 24-36 horas

04Identificadores

Referência
HEK293-GPRC5D (número de catálogo da Cytion 305989)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6G25

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
GPRC5D

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 1 mM de piruvato de sódio, 10 mM de HEPES, 1% de NEAA. Adicionar Geneticin (G418-Sulfat) para obter uma concentração final de 1 mg/mL.
Reagente de dissociação
Tripsina-EDTA
Subcultura
Para cultura de rotina de células aderentes: Aspirar o meio de cultura antigo das células aderentes e lavá-las com PBS para remover qualquer meio restante. Depois de aspirar o PBS, adicionar o volume adequado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incubar à temperatura ambiente ou a 37°C até as células se destacarem (5-10 minutos). Monitorizar o desprendimento sob um microscópio e, se necessário, bater suavemente no recipiente para libertar as células. Uma vez desprendidas, adicionar meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspender suavemente as células e transferir uma alíquota da suspensão de células para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Colocar o recipiente numa incubadora regulada para 37°C com 5%de CO2 e mudar o meio a cada 2-3 dias.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
2 a 4 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento

Após a descongelação, dividir as células numa proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixar as células recuperar do processo de congelação e aderir (para culturas aderentes) durante pelo menos 24 horas.

Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Feto