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JIMT-1
Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma duttale della mammella
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
JIMT1, JIMT

Documenti

JIMT-1

Cell line · Codice prodotto 305433

The JIMT-1 cell line is derived from a HER2-positive human breast carcinoma and is known for its resistance to trastuzumab, a commonly used HER2-targeted ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare JIMT-1 deriva da un carcinoma mammario umano HER2-positivo ed è nota per la sua resistenza a trastuzumab, una terapia comunemente utilizzata come bersaglio di HER2. Ciò rende JIMT-1 un modello prezioso per studiare i meccanismi di resistenza ai trattamenti anti-HER2 e per sviluppare nuove strategie terapeutiche. A differenza di molte altre linee cellulari di carcinoma mammario HER2-positivo, JIMT-1 imita i casi clinici in cui si osservano risposte iniziali alle terapie mirate a HER2, ma successivamente si sviluppa una resistenza. Questa caratteristica l'ha resa utile per esplorare l'efficacia di nuovi farmaci e terapie combinate volte a superare la resistenza al trastuzumab.

Le cellule JIMT-1 sono impiegate anche in studi che indagano l'interazione tra HER2 e altre vie di segnalazione, come quelle che coinvolgono il recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR). Il cross-talk tra queste vie contribuisce alla resistenza delle cellule alle terapie convenzionali. La ricerca ha dimostrato che le cellule JIMT-1 rispondono in modo variabile a diversi inibitori della tirosin-chinasi (TKI) e coniugati anticorpo-farmaco (ADC). Ad esempio, mentre la linea cellulare mostra resistenza a trastuzumab-emtansina (T-DM1) e mostra solo una parziale sensibilità a nuovi agenti come trastuzumab-deruxtecan (T-DXd), è stato dimostrato che ADC alternativi come disitamab vedotin (DV) potrebbero offrire una maggiore efficacia.

Gli studi in vitro evidenziano la versatilità di JIMT-1 per lo screening di farmaci che hanno come bersaglio non solo HER2 ma anche altre vie molecolari. Questi studi forniscono dati fondamentali per valutare gli effetti sinergici di trattamenti combinati che coinvolgono ADC e TKI o nuove terapie mirate. Il comportamento della linea cellulare in vari scenari di resistenza ai farmaci sottolinea la sua importanza nello sviluppo preclinico di farmaci, in particolare per il cancro al seno HER2-positivo con resistenza acquisita o intrinseca.

Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma duttale della mammella
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • JIMT1
  • JIMT

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
JIMT-1 (catalogo Cytion numero 305433)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2077

05Espressione e suscettibilità

Oncogeni
HER-2 (insensibile ai farmaci inibitori di HER-2, ad es. trastuzumab), ER-, PR-, AR-
Profilo mutazionale
Mutazione: PIK3CA, p.Cys420Arg (c.1258T>C), eterozigote; Mutazione: TP53, p.Arg248Trp (c.742C>T), omozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
62 anni
Etnia
Caucasico