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JIMT-1
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal da mama
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
JIMT1, JIMT

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JIMT-1

Cell line · Número do produto 305433

The JIMT-1 cell line is derived from a HER2-positive human breast carcinoma and is known for its resistance to trastuzumab, a commonly used HER2-targeted ...

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01Informações gerais

Descrição

A linha de células JIMT-1 é derivada de um carcinoma da mama humano HER2-positivo e é conhecida pela sua resistência ao trastuzumab, uma terapia direcionada para o HER2 comummente utilizada. Este facto faz da JIMT-1 um modelo valioso para o estudo dos mecanismos de resistência aos tratamentos anti-HER2 e para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Ao contrário de muitas outras linhas celulares de cancro da mama HER2-positivo, a JIMT-1 mimetiza casos clínicos em que se observam respostas iniciais a terapias dirigidas ao HER2, mas a resistência desenvolve-se subsequentemente. Esta caraterística tornou-a fundamental para explorar a eficácia de novos fármacos e terapias combinadas destinadas a ultrapassar a resistência ao trastuzumab.

As células JIMT-1 são também utilizadas em estudos que investigam a interação entre o HER2 e outras vias de sinalização, como as que envolvem o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). A interação entre estas vias contribui para a resistência das células às terapias convencionais. A investigação demonstrou que as células JIMT-1 respondem de forma variável a diferentes inibidores da tirosina quinase (TKIs) e conjugados anticorpo-fármaco (ADCs). Por exemplo, embora a linha celular apresente resistência ao trastuzumab-emtansine (T-DM1) e mostre apenas uma sensibilidade parcial a agentes mais recentes como o trastuzumab-deruxtecan (T-DXd), foi demonstrado que os ADC alternativos, como o disitamab vedotin (DV), podem oferecer uma maior eficácia.

Os estudos in vitro sublinham a versatilidade do JIMT-1 para o rastreio de fármacos que visam não só o HER2 mas também outras vias moleculares. Estes estudos fornecem dados essenciais para avaliar os efeitos sinérgicos de tratamentos combinados envolvendo ADCs e TKIs ou novas terapias direcionadas. O comportamento da linha celular em vários cenários de resistência a fármacos sublinha a sua importância no desenvolvimento pré-clínico de fármacos, particularmente para o cancro da mama HER2-positivo com resistência adquirida ou intrínseca.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma ductal da mama
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • JIMT1
  • JIMT

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
JIMT-1 (número de catálogo Cytion 305433)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2077

05Expressão e suscetibilidade

Oncogenes
HER-2 (insensível a medicamentos inibidores de HER-2, por exemplo, trastuzumab), ER-, PR-, AR-
Perfil mutacional
Mutação: PIK3CA, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozigótica; Mutação: TP53, p.Arg248Trp (c.742C>T), homozigótica

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
62 anos
Etnia
Caucasiano