Pereiti prie turinio
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
B ląstelių prolimfocitinė leukemija
Metastazių vieta
Periferinis kraujas (leukeminis)
Sinonimai
JVM3

Dokumentai

JVM-3

Cell line · Prekės numeris 305266

€0.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

JVM-3 – tai žmogaus B-limfocitų prolimfocitinės leukemijos (B-PLL) ląstelių linija, išskirta iš 73 metų amžiaus kaukazietiškos kilmės vyro periferinio kraujo. Linija auga suspensijoje kaip limfoblastoidinės ląstelės – pavieniui arba laisvais sankaupais – ir yra plačiai naudojamas B-PLL, retos ir agresyvios brandžių B ląstelių leukemijos, modelis. JVM-3 turi TP53 mutacijas (p.Pro1435Leu heterozigotinę ir p.Lys601Asn heterozigotinę), kurios inaktyvuoja p53 naviko slopintojo funkciją ir yra susijusios su atsparumu chemoterapijai B ląstelių piktybiniuose navikuose. Linija auginama 90 % RPMI 1640 + 10 % termiškai inaktyvuoto FBS terpėje.

JVM-3 tinka B-PLL tyrimams, įskaitant brandžių B ląstelių leukemijos biologijos tyrimus, su TP53 mutacijomis susijusio atsparumo vaistams tyrimus, BCR signalizacijos kelio analizę, tikslinio gydymo (BTK inhibitorių, venetoklakso, CD20-taikiniai antikūnai) bei farmakologiniam vaistų atrankiniam tyrimui, skirtam B ląstelių piktybiniams navikams. Ji taip pat naudojama B ląstelių leukemijos potipių lyginamuosiuose tyrimuose ir kaip ksenotransplantacijos modelis imuninės sistemos susilpnėjusiems recipientams.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
B ląstelių prolimfocitinė leukemija
Metastazių vieta
Periferinis kraujas (leukeminis)
Paraiškos
B ląstelių prolimfocitinės leukemijos tyrimai; subrendusių B ląstelių leukemijos biologija; vaistų atsparumas, susijęs su TP53 mutacijomis; BTK inhibitorių vertinimas; jautrumas venetoklaksui; CD20 antikūnų tyrimai; B ląstelių leukemijos vaistų atranka
Sinonimai
  • JVM3

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
limfoblastoidinės ląstelės, augančios pavieniui arba grupelėmis suspensijoje;
Ląstelių tipas
B limfoblastas
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
~30 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
JVM-3 (Cytion katalogo numeris 305266)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1320

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: p.Pro1435Leu, heterozigotinė; Mutacija: p.Lys601Asn, heterozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % termiškai inaktyvuoto FBS
Disociacijos reagentas
Nereikalinga (suspensinė kultūra)
Subkultūrinis auginimas
Kas 2–3 dienas kultūrą praskieskite šviežia, iš anksto pašildyta pilna terpe iki 2–5 × 10⁵ ląstelių/ml. Prieš perkeliant į kitą indą, suskaičiuokite gyvybingas ląsteles. Prireikus terpei pakeisti galima naudoti centrifugavimą (300×g, 5 min.).
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
3–5 × 10⁵ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
Kas 2-3 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
73 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių